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目的：从基因和蛋白的水平探讨PI3K/Akt信号通路与人上皮性卵巢癌顺铂耐药性的关系及其耐药性可能的发生机制。为寻找逆转卵巢癌化疗耐药的有效治疗手段提供一定的实验依据。方法：1、人上皮性卵巢癌细胞SKOV3细胞培养于含10%FBS、含100U/ml双抗的RPMI1640培养液，耐顺铂人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP细胞培养于含0.375ug/mlDDP、10%FBS的RPMI1640（含100U/ml双抗）培养液，两种细胞均置于37℃，5%CO2恒温培养箱中培养。对SKOV3及SKOV3/DDP细胞进行细胞计数，绘制两种细胞的细胞生长曲线。确定SKOV3及SKOV3/DDP细胞的对数生长期为培养后的3-5天，取对数生长期细胞用于实验。2、四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测SKOV3与SKOV3/DDP细胞的生长情况。3、实时定量PCR(Quantative Real-time PCR)法（简称Q-PCR法）检测SKOV3与SKOV3/DDP细胞中AKT与PI3K基因的含量。4、蛋白免疫印迹（Western-blotting）法检测SKOV3与SKOV3/DDP细胞中AKT、p-AKT和PI3K蛋白表达水平。结果：1、MTT比色法测定每孔吸光度值（OD值），可反应活细胞数量。SKOV3细胞第1天、第3天、第5天、第7天的OD值分别为0.069±0.008，0.210±0.009，0.551±0.006，0.418±0.079，SKOV3/DDP细胞第1天、第3天、第5天、第7天的OD值分别为0.030±0.004，0.147±0.010，0.329±0.005，0.252±0.058。SKOV3/DDP细胞在检测当天的OD度值均低于SKOV3细胞的OD值，SKOV3/DDP细胞的生长速度较SKOV3细胞缓慢（P<0.05）。2、Q-PCR检测发现SKOV3细胞中PI3K基因的2-Ct值为0.76±0.04，SKOV3/DDP细胞中PI3K基因的2-Ct值为1.49±0.04，SKOV3/DDP细胞中PI3K基因的含量明显高于SKOV3细胞中PI3K基因的含量，差异有统计学意义（P<0.05）。SKOV3细胞中Akt基因的2-Ct值分别为1.37±0.03，SKOV3/DDP细胞中Akt基因的2-Ct值为2.04±0.02，SKOV3/DDP细胞中Akt基因的含量明显高于SKOV3细胞中Akt基因的含量，差异有统计学意义（P<0.05）。3、Western blot检测发现SKOV3与SKOV3/DDP细胞中均有PI3K,Akt及p-Akt蛋白的表达。在SKOV3细胞中PI3K蛋白的相对表达量分别为0.80±0.03，在SKOV3/DDP细胞中PI3K蛋白的相对表达量为1.43±0.01，说明SKOV3/DDP细胞中PI3K蛋白的表达量明显高于SKOV-3细胞中PI3K蛋白的表达量，差异有统计学意义(P<0.05)，在SKOV3细胞中Akt蛋白的相对表达量为1.30±0.05，在SKOV3/DDP细胞中Akt蛋白的相对表达量为1.93±0.01，说明SKOV3/DDP细胞中Akt蛋白的表达量明显高于SKOV3细胞中Akt蛋白的表达量，差异有统计学意义（P<0.05）；在SKOV3细胞中p-Akt蛋白的相对表达量为0.68±0.03，在SKOV3/DDP细胞中p-Akt蛋白的相对表达量为1.06±0.06，说明SKOV3/DDP细胞中p-Akt蛋白的表达量明显高于SKOV3细胞中p-Akt蛋白的表达量，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1、PI3K，Akt与p-Akt蛋白在SKOV3细胞及SKOV3/DDP细胞中均有表达。说明PI3K/Akt通路与上皮性卵巢癌的发生有密切地联系。2、SKOV3/DDP细胞中PI3K，Akt与p-Akt蛋白的表达量均分别高于SKOV3细胞中同种蛋白的表达量。说明SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性的产生与PI3K，Akt与p-Akt蛋白的高表达有关。3．SKOV3/DDP细胞中PI3K、Akt基因的含量高于SKOV3细胞中PI3K、Akt基因的含量。说明SKOV3/DDP细胞的耐药与PI3K及Akt基因含量升高有关。