研究背景:缺血性脑卒中是当今危害人类健康的主要疾病之一,具有高发病率、高致残率和高死亡率的特点,严重危害了人类的健康。因此,积极研究与开发具有该治疗作用的药物,具有重大的临床医学价值。以川芎嗪为母核,利用药物拼合原理与香草酸原料合成的先导化合物川芎嗪-香草酸(化合物26PH-1),实验室前期在药理活性研究中已做大量工作;通过大鼠行为学、组织病理学、生理生化、免疫组化等研究方法,从整体、组织、分子水平研究了化合物26PH-1对实验性大鼠脑缺血性损伤的保护作用,并初步探讨了其可能的作用机理。本课题的研究由国家自然科学基金(No.81173519)和北京中医药大学创新团队(2011-CXTD-15)共同资助。研究目的:通过文献的调研和正交试验,希望确立化合物26PH-1的合成工艺,中间体2-溴甲基-3,5,6-三甲基吡嗪的最优合成方法;参照2010年版药典(化学药品)的要求,期望能够初步制定化合物26PH-1的质量标准控制草案;在实验室前期药理工作的基础上,对化合物26PH-1的相关药效学作了进一步研究,期望得出可能的次级代谢产物。研究方法:对合成工艺中的反应时间、溶剂、投料比、反应温度等影响因素,通过小试探索和多因素多水平的正交试验研究,确定了化合物26PH-1及其中间体2-溴甲基-3,5,6-三甲基吡嗪的最优工艺参数。采用红外光谱、质谱和核磁共振表征了化合物26PH-1的结构特征;利用HPLC、LC-MS/MS和GC的分析手段对化合物26PH-1进行了有关物质和相关杂质等方面的质量控制研究工作。研究结果:在合成工艺及质量标准研究方面,确定了中间体2-溴甲基-3,5,6-三甲基吡嗪和化合物26PH-1的最优合成条件;按照2010年版药典(化学药品)的检测要求,初步制定了化合物26PH-1的质量标准草案。在相关药效学研究方面,对大鼠的尿液代谢分析中检测出4种Ⅰ相代谢产物和3种Ⅱ相代谢产物;主要代谢途径为O-去甲基化、醚键断裂、酯键断裂等反应;通过快速膜乳化-溶剂萃取/挥发法成功制备出化合物26PH-1的微球,并简单得出相关的工艺参数。研究结论:按照新药(化学药品)研究指导原则的要求,对化合物26PH-1进行鉴别、有关物质及含量方面的质量研究工作,并按照中国药典2010年版二部相关附录的要求,对化合物26PH-1进行了专属性、有关物质、线性范围和重现性等方法学验证,结果均符合相关规定,为该药物的质量评价和质量控制提供了实验依据;针对化合物26PH-1难溶于水、体内生物利用度低、药理给药途径不明确的特点,通过两种不同的方式改变了其水溶性,为同类型的先导化合物在体内生物利用度低的特点提供了可借鉴的思路。