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目的:结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年上升趋势,在我国,结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的发病率位于全部恶性肿瘤的第4~6位,居消化系统的第2~3位,虽然我国CRC的发病率低于西方发达国家,但是随着我国现代化程度的提高,国民的饮食结构发生了很大的变化,精细食物和高蛋白、高脂肪食物的摄入不断增多,致使CRC的发病率在最近20年里以平均每年约4.20%的速度增加。近25年的结直肠癌5年生存率徘徊在50~60%左右[6],CRC的侵袭转移是有效治愈CRC的最大障碍。
本研究旨在探讨细丝蛋白A(filamin A,FLNa)在结直肠腺癌组织中的表达,为进行结直肠癌等恶性肿瘤的诊治与预防转移的实验研究提供新的思路。
方法:收集河北医科大学第四医院外二科2009年1-9月间60例患者手术切除的结直肠腺癌组织和正常结直肠组织。癌组织取自肿瘤中心处,正常组织取自距肿瘤边缘至少10cm处;所有病例均经病理论断确诊,均无其他部位原发肿瘤,术前无化疗、放疗和免疫治疗史。应用RT-PCR检测技术、Western blot检测技术和免疫组织化学技术对结直肠腺癌与正常结直肠组织中FLNa的mRNA和蛋白质的表达情况分别进行定位及定量检测。
结果:
1 FLNa的RT-PCR检测
以GAPDH作为内参照,以FLNa/GAPDH值来定量。结果显示,癌组织中FLNa mRNA的表达水平较正常组织低,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)(图1)。
2 FLNa的Western blot检测
以GAPDH作为内参照,以FLNa/GAPDH值来定量。结果显示,FLNa蛋白在癌组织中的表达水平较正常组织低,两组间差异有统计学意义(P<0.05)(图2)。
3 FLNa的免疫组化染色检测
FLNa免疫组化阳性染色产物位于细胞质。癌组织中FLNa的表达低于癌旁正常组织(图3)。FLNa在癌组和正常组表达的阳性率分别为50%、91.67%,癌组明显低于正常组(表1)。
结论:
1、RT-PCR检测显示FLNa在结直肠腺癌组织中的表达较正常组织低;
2、Western blot检测显示FLNa在结直肠腺癌组织中的表达较正常组织低;
3、免疫组化染色检测显示FLNa在结直肠腺癌组织中的表达较正常组织低;
4、基因和蛋白表达呈明显的相关性;
5、结直肠腺癌组织中FLNa基因表达抑制,表明FLNa基因可能是一个抑癌基因;
6、本课题研究从不同的侧面说明FLNa与肿瘤发生发展具有高度相关性;为进一步进行结直肠癌等恶性肿瘤的诊治与预防转移的实验研究提了供新的思路;
7、应进一步研究FLNa在结直肠癌不同组织类型中的表达与癌的恶性程度的相关性,FLNa可能会作为一个结直肠腺癌分期的分子标志物。