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目的通过COXB3病毒感染Balb/C 4-6周龄雄性小鼠建立急性病毒性心肌炎模型,旨在探索病毒性心肌炎疾病进展与小鼠主要组织相容性复合体多态性有无相关性,以阐明病毒性心肌炎的免疫遗传学特征,为病毒性心肌炎的发病机制及人类主要组织相容性复合体多态性的相关性研究提供思路与方法,为筛选易感人群并实施可能的预防措施提供新的思路。同时,进一步探寻病毒性心肌炎发病中的保护基因,为可能的基因治疗提供靶基因,探索治疗新途径。方法本试验分为动物实验部分及分子实验部分:（一）动物实验:常规传代培养人类宫颈癌细胞（Hela细胞）,用柯萨奇B3病毒（coxsackie virus B3,COXB3）感染Hela细胞,扩增病毒以增加病毒毒力,收集病毒上清液,对病毒进行毒力滴定并计算半数组织感染剂量(50%tissue culture infective dose,TCID50),并以不同病毒浓度接种实验小鼠,根据第7天小鼠血清CKMB水平及心肌组织病理改变选择合适的造模病毒感染量;选取120只小鼠,随机均匀分为病毒组及对照组,根据上述实验确定的病毒感染量进行腹腔接种病毒液,每天随机从两组中各选取两只小鼠进行取血解剖,ELISA法检测血清IFN-γ浓度,按照对照组结果,记录血清IFN-γ高于正常区间、升高峰值及降至正常水平区间的时间点,同时以心肌组织病理改变作为内参照;（二）分子实验:随机选取80只小鼠,均匀分为病毒组及对照组,其中每组再均匀随机分为3小组,记录小鼠体重及活动情况,根据预实验IFN-γ水平确定的时间点对小鼠进行处死解剖处理,ELISA方法确定血清IFN-γ浓度,心肌组织进行HE染色观察,计算心肌病变积分,根据文献报道的Balb/C小鼠H2-Eb区第二个外显子的核酸序列设计4组引物,以IFN-γ基因作为内参照,RT-PCR法检测心肌组织上述基因表达情况,同时对心肌组织进行病毒分离与RNA提取并以实时荧光定量PCR法进行病毒鉴定。结果（1）病毒感染造模量的选择:经COXB3Nancy株感染后72小时后的Hela细胞发生变形脱落坏死,通过观察细胞CPE,运用Reed-Muench法计算TCID50为10-3,得出本实验COXB3病毒浓度为103TCID50/ml;（2）造模最适病毒浓度:一般情况:A组小鼠在第3天开始出现明显的活动量及体重下降,第7呈现死亡高峰,B组及C组小鼠第4天开始出现活动量减差,但7天内无小鼠死亡,D组小鼠体重稳定增加,无小鼠死亡;（3）血清CKMB水平:病毒感染后的小鼠第7天血清CKMB水平比较中,A组高于B组及C组,明显高于D组;（4）心肌组织病理:A组小鼠心肌组织病理可见心肌溶解,出现了大片状的坏死病灶;B组及C组小鼠心肌内肉眼未见明显坏死,镜下可见炎性细胞浸润,D组小时心肌间质未见炎症细胞浸润表现;结合小鼠体重变化、血清CKMB水平及心肌病理改变选择的造模合适病毒量为103TCID50。（5）VMC小鼠血清IFN-γ的水平变化:经ELISA法检测小鼠血清IFN-γ水平可以观察到在接种病毒第3天左右开始升高,2周左右达高峰,3周左右开始水平慢慢降低。（6）心肌组织病理积分:在显微镜下,对HE染色后的小鼠心肌组织切片进行观察并计算病理积分,经统计学分析病毒组小鼠在第3d、7d、14d及28d的病理积分与对照组相较,差异均有显著的统计学意义（P值均<0.01）;（7）对Balb/C小鼠H2-Eb区第二个外显子核酸序列设计4组序列特异性引物表达水平与其心肌病理变化进行相关性分析:经计算第3天的病理积分与MudoEb5阳性的结果的相关系数r=0.449 P<0.05,第7天,r=0.745 P<0.05,第14天r=0.712 P<0.05,第14天r=0.676 P<0.05,表明VMC小鼠病理积分与MudoEb5表达水平之间存在正相关关系,同时进行MudoEb 7表达水平与病理积分的相关性分析表明,两者也存在正相关。结论病毒性心肌炎感染过程中会出现IFN-γ水平变化,并与感染程度有一定的相关性,H2基因可能通过参与免疫调节,而导致心肌组织对病毒的出现不同的易感性。