苍耳子抗炎活性多糖的研究

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苍耳子(Fructus xanthii)为菊科苍耳属植物苍耳的带总苞果实,在历代《中国药典》中均有收录。多糖是苍耳子的重要活性成分之一。为了了解苍耳子多糖的化学结构及生物活性,本文对苍耳子多糖进行了提取、分离纯化、结构表征、抗氧化、抗炎及免疫调节活性的研究。论文的研究结果将为苍耳子多糖的开发与利用提供数据和理论基础。采用热水、螯合剂、0.05 mol/L Na OH和1.0 mol/L Na OH四种溶剂从苍耳子中顺序提取出四种粗多糖组分WXP、CXP、BXP、AXP,并将WXP与AXP通过DEAE-52纤维素柱得到均一组分WXP-3与AXP-1。化学组成分析结果表明,WXP、BXP、AXP、CXP、WXP-3和AXP-1均为杂多糖,总糖含量分别为54.2%、68.3%、53.9%、45.9%、99.1%、92.6%,糖醛酸含量分别为9.3%、12.0%、10.3%、5.3%、7.2%、9.7%,蛋白质含量分别为12.7%、7.3%、15.4%、21.5%、0%、0%。6个多糖组分在红外光谱中均显示出典型的多糖官能团吸收峰。采用部分酸水解、甲基化等化学分析方法和GC、GC-MS、FT-IR、HPGPC、NMR等波谱学手段,对WXP-3和AXP-1的结构进行表征。实验结果表明WXP-3是由阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、木糖、甘露糖和葡萄糖组成的带有部分RG-Ⅰ果胶区域的II型阿拉伯半乳聚糖(AG-II),以→6)-β-D-Galp-(1→、→2)-α-L-Rhap-(1→和→4)-β-D-Glcp-(1→为主体骨架,阿拉伯糖、木糖、甘露糖和半乳糖的糖残基通过→6)-β-D-Galp-(1→的O-3连接在主链上。AXP-1是由阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖组成的II型阿拉伯半乳聚糖,多糖骨架是在O-3位高度分支化的→6)-β-D-Galp-(1→,支链包括α-L-Araf-(1→、→5)-α-L-Araf-(1→、β-D-Glcp-(1→、→4)-α-D-Galp A-(1→。抗氧化实验表明,WXP、CXP、BXP、AXP可有效清除DPPH、OH和ABTS自由基并促进Fe3+还原,表现出良好的抗氧化活性。抗炎活性研究表明,苍耳子粗多糖、均一多糖WXP-3和其脱支链多糖WXP-3s均可通过抑制NO的产生缓解细胞的炎症反应,且呈现剂量依赖性。进一步研究表明,WXP-3可有效抑制促炎因子i NOS、IL-1β和TNF-α的m RNA表达和IκBα、NF-κB的磷酸化,保持NF-κB的三聚体失活状态,从而达到抑制炎症反应的作用。免疫调节活性研究表明,AXP-1和AXP-1s在各浓度下均可有效促进巨噬细胞的增殖、NO释放以及吞噬活性(P<0.01)。与AXP-1相比,AXP-1s表现出更强的免疫调节活性,表明分支链的脱除和分子量的降低可有效提高多糖的免疫调节活性。
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