目的：现代联合化疗方案使急性白血病的诱导缓解率显著提高,但达骨髓完全缓解后白血病复发仍是阻碍患者长期无病生存(DFS)的主要原因。研究发现,微小残留病与白血病复发密切相关。微小残留病是指临床缓解的白血病患者体内能检测到的微量白血病细胞。由于传统形态学检测的敏感性较低,目前临床缓解标准(骨髓原始细胞<5%),并不能准确反映患者体内残留白血病细胞的负荷,因此化疗方案及强度的制定往往取决于临床医师的经验,存在化疗不足或过度化疗的问题。因此寻找灵敏度高、特异性强、快速有效、重复性好的MRD检测手段及标靶,是十分重要的。本研究应用实时荧光定量RT-PCR技术检测黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)基因在急性白血病患者中的表达,探讨该基因的临床意义及其作为MRD检测标靶的可行性。材料和方法：1．研究对象为119例急性白血病患者,均为河南省人民医院2009年2月至2009年12月门诊或住院初诊患者,诊断标准参照FAB协作组制定的标准。其中男71例(59.7%),女48例(40.3%),中位年龄30岁(2—78岁)；包括AML97例(M2 38例,M3 24例,M4 18例,M5 15例,M6 2例),ALL 22例。对照组28例(正常健康人11例,非恶性肿瘤患者17例)。实验过程中严格设立内参照(GAPDH)及空白对照(去离子水,即无模板)。应用基于TaqMan探针的实时荧光定量RT-PCR技术检测患者PRAME mRNA的表达,并与FLT3 mRNA的表达相比较。采用相对定量法分别分析急性白血病患PRAME、FLT3者基因与正常人相比的差异表达倍数,靶基因的差异表达倍数=2-△△Ct。其中△△Ct=△CtQ-△CtC。△CtQ为患病组靶基因的Ct值与管家基因的Ct值之差；△CtC为对照组靶基因的Ct值与管家基因的Ct值之差。参照文献,当样本与阴性样本的差异表达倍数大于10时为阳性表达。2.采用SPSS10.0统计软件进行统计学分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,2组间比较采用t检验,率的比较采用卡方检验,p<0.05为差异有统计学意义。结果：1. PRAME在急性白血病中的表达PRAME mRNA在急性白血病的相对表达量为对照组的20.97倍(t=2.42,p=0.001<0.05)。其中AML阳性率为51.5%(50/97例),ALL阳性率为36.4%(8/22例)。ALL与AML组表达阳性率相比,差异无统计学意义(χ2=12.72,p=0.097>0.05)。2.FLT3在急性白血病中的表达FLT3在各种类型白血病中均有表达,而在正常人骨髓中均未见阳性表达。FLT3 mRNA在急性白血病的相对表达量为对照组的18.64倍(t=5.28,p=0.000<0.05)。其中AML阳性率为80.4%(78/97例),ALL阳性率为81.8%(18/22例)。ALL组与AML组表达阳性率相比,差异无统计学意义(χ2=13.35,p=0.39>0.05)。3. PRAME在正常人及非恶性肿瘤患者中的表达11例正常人及17例非恶性肿瘤患者中有5例测得有PRAME mRNA微量表达,其相对表达量为部分对照组(即从28例整体对照组中除去此5例有微量表达者的余下23例)的1.37倍(t=2.06,p=0.000<0.05),与部分对照组相比,差异无统计学意义(t=0.60,p=1.47>0.05),故仍归入整体对照组,不认为是阳性表达。4.患者治疗前后比较短期跟踪9例PRAME、FLT3均阳性患者,以实时荧光定量RT-PCR检测所有患者经过化疗达完全缓解后,PRAME表达均有不同程度的下降且其中5例患者复发时PRAME基因又呈上升趋势。9例跟踪患者初诊时相对表达量为治疗后相对表达量的15.67倍(t=2.63,p=0.007<0.05)。5例复发患者复发时相对表达量为治疗后的16.22倍。结论：1. PRAME基因在正常人及非恶性肿瘤患者中不表达,在急性白血病患者中阳性表达,且表达水平随病情变化而变化。2. PRAME基因与FLT3基因的检出结果有关联,作为MRD的检测,前者可作为后者的补充。