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目的:通过收集临床上恶性和良性胸腔积液标本,检测热休克蛋白90β(Hsp90β)、血管内皮生长因子(VEGF)、癌胚抗原(CEA)在胸腔积液中的浓度,评估三项指标单独及联合检测在鉴别良恶性胸腔积液中的诊断价值。方法:收集2016年09月至2018年09月在南京医科大学附属苏州医院呼吸科住院的胸腔积液患者80例,其中恶性胸腔积液患者共40例,良性胸腔积液患者者40例。采用双抗体夹心ELISA法检测胸腔积液中Hsp90β、VEGF和CEA的水平。计量资料组间比较采用Mann-Whitney U秩和检验验证,计数资料采用c2检验。以敏感度作为纵坐标、1-特异度为横坐标绘制ROC曲线,分别计算曲线下面积。选择最佳诊断分界点及诊断敏感性和特异性,计算三项指标单独及联合检测的诊断效能。所有检验均以P<0.05为有统计学意义。结果:1、恶性胸腔积液中Hsp90β、VEGF、CEA的表达水平显著高于良性胸腔积液,差异具有统计学意义(P<0.001)。2、ROC曲线显示Hsp90β的曲线下面积为0.852(95%CI,0.764-0.941),最佳临界值1413.43 pg/ml时,Hsp90β诊断的敏感性为87.5%,特异性为82.5%;ROC曲线显示VEGF的曲线下面积为0.798(95%CI,0.696-0.900),最佳临界值484.13 pg/ml时,VEGF诊断的敏感性为75.0%,特异性为82.5%;ROC曲线显示CEA的曲线下面积为0.907(95%CI,0.843-0.971),最佳临界值6.03ng/ml时,CEA诊断的敏感性为75.0%,特异性为97.5%。3、Hsp90β、VEGF联合检测的敏感性为95.0%,特异性为67.5%,ROC曲线下面积为0.886(95%CI,0.811-0.962);Hsp90β、CEA联合检测的敏感性为95.0%,特异性为80.0%,ROC曲线下面积为0.949(95%CI,0.905-0.994);VEGF、CEA联合检测的敏感性为90.0%,特异性为80.0%,ROC曲线下面积为0.929(95%CI,0.864-0.995);三项指标联合检测的敏感性为97.5%,特异性为67.5%,ROC曲线下面积为0.963(95%CI,0.927-0.998)。结论:1、Hsp90β、VEGF和CEA的表达在恶性胸腔积液中显著高于良性胸腔积液,可以作为鉴别良恶性胸腔积液的有临床价值的生物标记物。2、胸腔积液中Hsp90β、VEGF及CEA任意两项指标联合检测的敏感性均高于单项检测,三项指标联合检测的敏感性最高,可达97.5%,但联合特异性降低,为67.5%。3、综合各项指标单独及联合检测的ROC曲线,曲线下面积最高的为三项指标联合检测,达0.963;最低的为VEGF单项检测,为0.798。提示联合检测具有更高的诊断效能。4、根据各项指标单独及联合检测的敏感性和特异性,推荐临床应用Hsp90β与CEA联合检测,因其兼顾较高的敏感性及特异性。