目的:研究溶血磷脂酸对体外培养人视网膜色素上皮细胞CD95因子表达的影响,探索hRPE细胞移植前LPA促增繁殖的适宜浓度。方法:取第三代人视网膜色素上皮细胞,用MTT法初步筛选LPA的促细胞增殖的适宜浓度,采用流式细胞术作出LPA对CD95表达的浓度和时间曲线。用流式细胞术Annexin-V/PI双标法比较各种不同LPA浓度下hRPE细胞的凋亡率、坏死率及比较不同浓度LPA对anti-CD95 IgM诱导的细胞凋亡的保护作用,并用细胞杀伤实验来检测不同浓度LPA对hRPE细胞的保护作用。结果:LPA对hRPE细胞有促增殖作用。10uM是接近饱和的浓度。40u M以上的浓度,细胞增殖率开始下降。80uM以上浓度开始对细胞有毒性作用,细胞凋亡率和坏死率均增加。LPA能抑制CD95的表达。0-40uM范围内,CD95表达率随LPA浓度增加而减少,40uM时表达率随作用时间延长而减少(组间比较P<0.05)。LPA能抑制hRPE细胞凋亡。在0-40uM范围内,LPA对hRPE细胞自身及anti-CD95 IgM诱导的凋亡均有抑制作用,细胞凋亡率随着浓度增加而减少(组间比较P<0.05)。LPA能使hRPE细胞逃避CTL的杀伤作用。在0-40uM范围内,CTL对hRPE细胞的杀伤作用,随着LPA溶度增加而减少(组间比较P<0.05)。LPA对CD95表达率的影响和对CTL杀伤率影响呈正相关关系(平均荧光强度r=0.994,P<0.01,阳性细胞率r=0.996,P<0.01)。结论:LPA能通过抑制CD95表达来促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,使hRPE细胞逃避CTL的杀伤。40uM是LPA促hRPE细胞增殖的理想浓度。