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背景与目的: 急性全脑缺血事件在临床上多见,主要见于心脏骤停、休克等全身血液动力学变化引起的脑供血不足。多种器官包括大脑短时间暴露于某种亚致死性剂量的损伤后,机体会启动内源性的保护机制,可减轻后续发生的缺血损伤,这一现象称缺血耐受。预处理需在缺血前实施,而临床上脑缺血事件难于预测,使其在临床上的应用受到一定的限制。低氧后处理在脑缺血后实施,为无创干预,在临床更为可行。我们先前研究显示低氧后处理可明显减少大鼠短暂全脑缺血后海马CA1区神经元的死亡,但作用机制还不完全清楚。本研究在成年大鼠短暂全脑缺血低氧后处理模型的基础上研究HIF-1α和VEGF蛋白在大鼠海马的表达变化,探讨HPC是否通过HIF-1α/VEGF信号传导通路抑制凋亡,从而对成年大鼠tGCI起神经保护作用的。 材料与方法: 选取成年雄性Wistar大鼠,体重220～280g。按照Pulsinelli经典的四血管闭塞制作全脑缺血模型。大鼠短暂全脑缺血10min后1d给予低氧后处理,即将大鼠放入密闭防潮箱内连续通入8％O2/92%N2混合气体2h。运用尼氏染色、Fluoro-JadeB染色、免疫组化、免疫荧光、Westernblot等方法,分别观察短暂全脑缺血组、单纯低氧组、短暂全脑缺血组+低氧后处理组大鼠海马区细胞形态改变以及HIF-1α、VEGF、cleavedcaspase-9、cleavedcaspase-3表达变化。 结果: 尼氏染色、NenN免疫组化和Fluoro-JadeB染色显示,与短暂缺血10min再灌注7d组比较,低氧后处理可显著增加海马CA1区存活神经元数及减少变性神经元数。海马CA1区HIF-1α和VEGF的表达水平在短暂缺血10min再灌注后0h、4h、26h明显增高(p<0.05),4h达高峰,cleavedcaspase-3andcaspase-9的表达水平在短暂缺血10min再灌注后4h、26h、50h明显增高(p<0.05),50h达高峰,予低氧后处理后24h,与对应的缺血再灌注50h比较,HIF-1α和VEGF的表达水平升高(p<0.05),cleavedcaspase-3andcleavedcaspase-9的表达水平降低(p<0.05)。免疫双标结果显示,海马CA3区各组cleavedcaspase-3andcleavedcaspase-9的表达无明显变化。HIF-1α与神经细胞核和胞浆共表达,VEGF与神经细胞核和星形胶质细胞共表达。 结论: HIF-1α/VEGF通路参与低氧后处理对成年大鼠短暂全脑缺血的神经保护机制,低氧后处理可能通过活化HIF-1α/VEGF通路,抑制casapses依赖的凋亡途径,减少神经细胞损伤,从而产生神经保护作用。