缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠JAK2-STAT3和Bcl-2/Bax表达的影响

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目的:建立大鼠MCAO模型,研究缺血后处理对缺血再灌注脑组织的保护作用,尤其注意观察不同年龄大鼠中缺血后处理脑保护作用是否存在差异。方法:健康雄性SD大鼠,幼年组(1-2月,150-200g)36只;青年组(4-5月,300-350g)36只;中老年组(14-16月,480-520g)36只,各年龄组随机分为Sham组、I/R组和IPO组,共分为9个亚组,每个亚组12只大鼠。采用改良Longa法建立MCAO模型,I/R组在大鼠缺血2h后再灌注;IPO组在大鼠缺血2h后再灌注之前实施3个循环的15s/15s(再灌注/缺血);Sham组除不插拴线外,其余操作与I/R组相同。再灌注24h后测各组大鼠的神经功能缺损评分,每个亚组随机选取6只大鼠用作TTC染色法测梗死灶大小,剩余6只大鼠用作TUNEL染色法测细胞凋亡。结果:各年龄组的Sham组大鼠的神经功能缺损评分为0分,无梗死灶,极少的TUNEL染色阳性凋亡细胞;与相应年龄组I/R组相比,幼年IPO组的神经功能缺损评分显著降低(P<0.05),青年IPO组和中老年IPO组差异无统计学意义(P>0.05);与相应年龄组I/R组相比,各年龄组IPO组的梗死灶明显减小(P<0.05),幼年组减小34.6%,青年组减小23.3%,中老年组减小17.2%;与相应年龄组I/R组相比,各年龄组IPO组的TUNEL染色阳性凋亡细胞明显减少(P<0.05),幼年组减少53.7%,青年组减少27.6%,中老年组减少21.2%。相比于幼年I/R组,青年I/R组和中老年I/R组的神经功能缺损评分、梗死灶大小、TUNEL染色阳性凋亡细胞方面均显著增高(P<0.05);青年I/R组和中老年I/R组比较,两者之间神经功能缺损评分、梗死灶大小、TUNEL染色阳性凋亡细胞相比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:缺血后处理对各年龄组缺血再灌注大鼠都有脑保护作用,可以减小梗死灶大小,减少凋亡细胞。缺血后处理的脑保护作用在不同年龄组中有差异,在幼年组中脑保护作用最强。目的:探讨IPO对大鼠MCAO再灌注模型p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2/Bax比值的表达的影响,阐明JAK2/STAT3信号通路及Bcl-2/Bax比值在IPO中的作用。方法:健康雄性SD大鼠(4-5月,280-320g)随机分为Sham组(n=10)、I/R组(n=50)、IPO组(n=50)、AG490组(n=10),根据再灌注后6h、12h、24h、48h、72h,将I/R组和IPO组随机各分为5个亚组,共分为12个亚组,每组10只大鼠。测定各亚组大鼠的神经功能缺损评分,每个亚组随机选取4只大鼠用TTC染色法测大鼠脑梗死体积,剩余6只大鼠用Western Blot法测定海马中p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2、Bax的表达情况。结果:与Sham组相比,I/R组、IPO组、AG490组的神经功能缺损评分、脑梗死体积明显增高(P<0.05)。与Sham组相比,I/R组中p-JAK2、p-STAT3表达显著增加(P<0.05);相比于I/R组,IPO组和AG490组p-JAK2、p-STAT3表达显著下降(P<0.05);在I/R组和IPO组的各时间点亚组中,p-JAK2、p-STAT3表达先升高,24h达到高峰后下降。与Sham组相比,I/R组中Bcl-2/Bax的比值显著下降(P<0.05);相比于I/R组,IPO组和AG490组Bcl-2/Bax的比值显著上升,(P<0.05)。结论:缺血后处理通过JAK2/STAT3信号转导通路抑制细胞凋亡水平,实现其对缺血再灌注脑组织的保护作用。AG490处理也可以达到类似的效果。
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