论文部分内容阅读
人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)属于疱疹病毒β亚科,是导致中枢神经系统先天性异常的最重要病原体之一。HCMV在人群中感染非常普遍,我国成人感染率大于90%。越来越多的研究显示,HCMV感染与肿瘤之间存在密切联系,在多种肿瘤组织如脑胶质瘤、结肠癌等中都可检测到HCMV的基因及蛋白。本研究组前期的实验证明了HCMV对胶质瘤的发生发展起到影响。为进一步了解HCMV感染与胶质瘤之间的作用机制,以佛波酯为诱导剂诱导THP-1单核细胞成为巨噬细胞,建立了THP-1源性巨噬细胞模型。以RT-PCR检测HCMV即刻早期基因(IE)及晚期基因(UL99)的表达,结果显示巨噬细胞可完整表达IE及UL99。利用酶联免疫吸附测定(ELISA)对巨噬细胞感染HCMV后的表皮生长因子(EGF)进行检测,发现HCMV可促进巨噬细胞EGF的分泌。共培养巨噬细胞与U87细胞,HCMV感染巨噬细胞后以Western-blot检测U87细胞表皮生长因子受体(EGFR)的表达变化,结果表明HCMV感染巨噬细胞组的U87细胞EGFR表达量高于对照组(p<0.05),HCMV感染巨噬细胞可上调U87细胞EGFR的表达。利用Transwell体外侵袭实验检测HCMV感染的巨噬细胞对U87侵袭能力的影响,结果显示HCMV感染组侵袭到小室膜下的细胞数量高于未感染组(p<0.05),HCMV感染巨噬细胞可促进U87细胞的侵袭。再以Western-blot检测局部黏着斑激酶(FAK)及Tyr397 FAK,结果表明HCMV感染组Tyr397 FAK蛋白相对表达量高于对照组(p<0.05),HCMV感染可上调FAK的磷酸化。本研究分析了HCMV感染的巨噬细胞对胶质瘤恶性行为的影响,这为进一步阐释HCMV感染的分子机制及HCMV感染与肿瘤之间的关系奠定了理论基础。