【摘 要】
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背景和目的 信号转导与转录激活因子1(signal transducers and activators of transcription1,STAT1)是一种重要的核转录因子,主要位于细胞浆,当细胞受到外界信号刺激时,STAT1发生磷酸化而被激活并转入细胞核参与靶基因的转录调控,在细胞未受到刺激时STAT1蛋白仍有部分存在于细胞核中并参与某些基因的组成性表达。STAT1的转录调控功能需要其
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背景和目的 信号转导与转录激活因子1(signal transducers and activators of transcription1,STAT1)是一种重要的核转录因子,主要位于细胞浆,当细胞受到外界信号刺激时,STAT1发生磷酸化而被激活并转入细胞核参与靶基因的转录调控,在细胞未受到刺激时STAT1蛋白仍有部分存在于细胞核中并参与某些基因的组成性表达。STAT1的转录调控功能需要其他转录因子的协助,但是这些转录因子与STA1蛋白如何组装成有功能的转录复合物从而调节转录的具体机制尚不清楚。核基质(Nuclear matrix,NM)是细胞核内的不溶性的蛋白骨架,维系DNA的结构和功能,调节DNA的构象并参与基因表达调控。近年的研究发现核基质与许多转录因子密切相关,不仅是转录因子发挥作用的支架结构,而且有些核基质蛋白自身就是转录因子。但是核基质与转录因子STAT1是否相关尚不清楚。 为此,本研究以Hela细胞作为实验模型,应用免疫印迹和免疫荧光方法对IFN-γ刺激和未刺激的Hela细胞中STAT1、pSTAT1与核基质的关系进行研究,以初步探讨它们之间的相互关系,希望有助于了解STAT1的转录调控机制。 材料和方法 1.应用Wen法提取Hela细胞核基质蛋白(Nuclear matrix proteins,NMPs),通过免疫印迹法对IFN-γ处理和未处理的Hela,全细胞、细胞核、核基质蛋白进行STAT1和pSTAT1的检测。 2.用Staufenbiel等改良法原位抽提Hela细胞制备核基质,通过免疫荧光方法对STAr1和pSTAT1在细胞内的表达进行定位; 结果 1.免疫印迹分析结果显示:
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