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房性心动过速是起源于心房的快速心律失常,表现为短阵自限性、阵发持续性和持续无休止性心动过速。老年人房速的发生率较高,75~85岁老年人中阵发性房速的发生率为13%。根据房速的起源病灶、部位、电生理机制,Lesh将其分为局灶性房性心动过速、不适当窦性心动过速、大折返性房性心动过速和心房颤动。 界嵴(Crista terminalis, CT)是右心房心内膜面肌性隆起,起自右心耳内面,经上腔静脉口前方下行,与下腔静脉口前缘瓣膜(欧氏嵴)相延续,其向前发出的平行柱状结构称梳状肌。随着局灶性房性心动过速特别是心房颤动(房颤)介入治疗的迅速发展,作为右房独特解剖结构之一的界嵴在房性心律失常发生中的作用已成为人们关注热点。局灶性房颤异位兴奋灶绝大多数(90%以上)位于肺静脉和腔静脉,其组织结构、电生理特征已有一定研究,国内学者杨延宗就此提出了“肌袖性心律失常”的概念。界嵴是局灶性房颤关键部位之一、局灶性房速最常见部位,同时也是典型心房扑动和不适当窦性心动过速的重要解剖基础,参与了所有类型的房性快速心律失常,Kalman等提出了“界嵴性心动过速”(Cristal tachycardias)的概念。由于与临床心房电生理密切相关的心脏局部解剖、组织学特征和基础电生理研究相对滞后,临床上射频消融的安全性和有效性受到了一定程度的限制。界嵴的解剖结构对房性心律失常的发生提供了什么样的“基质”?老年人房速的发生率明显增高,在老龄化进程中,界嵴组织结构有何变化?界嵴和梳状肌是毗邻结构,具有不同的胚胎来源,两者在心律失常的发生中如何互动,其基础电生理特征如何?这些问题均有待进一步研究。 本课题以兔界嵴为研究对象,从解剖、组织电生理、细胞电生理的角度分三部分探讨界嵴在房性心动过速特别是心房颤动发生和维持中的作用。 第一部分:兔界嵴解剖、组织学结构研究。旨在探讨界嵴参与房性心动过速的解剖和组织学基础。具体内容包括:界嵴及其毗邻部位大体结构观察;界嵴组织结构、胶原含量、连接蛋白43分布的增龄性变化;界嵴组织的超微结构。方法:(1)收集新西兰家兔右心房标本68个,肉眼观察界嵴及其毗邻部位大体结构。(2)新西兰大耳幼兔(20~30天)、成年兔(6~8月)、老年兔(26~28月)各14只,随机分为二组(n=7),分别进行组织学检查和电传导特性研究(实验第二部分)。家兔麻醉后开胸取出心脏,剪取整个右房组织,10%福尔马林液固定48小时,取界靖及其两侧的梳状肌和腔静脉窦标本制成石蜡切片。行HE、Masson染色,在光学显微镜下观察界晴的细胞形态、纤维走向、胶原含量,免疫组织化学检测Cx43表达并行组织图象定量分析。(3)新西兰成年兔和老年兔各2只,开胸取出心脏,放入。℃台氏液中,迅速剪取界峭组织,剪成Zmm3左右组织块2一3块,2.5%戊二醛固定。制作超薄切片,电子透射显微镜观察细胞超微形态结构。结果:(l)界峭是右房心内膜面的肌性隆起,呈C形。界峭全程隆起者占61.7%,上2/3隆起、上1/3隆起者分别为24.5%和13.8%,其余表现为小梁部和光滑部的分界。界晴上部与腔静脉前肌束相延续。梳状肌从界峭发出,74%平行排列、26%相互交织成网状。梳状肌与基底部相连形成“峭样结构”或中间架空形成“桥样结构”。界峭下部与下腔静脉口前缘瓣膜(欧氏晴)相延续,在峡部向三尖瓣和冠状窦口发出分支,部分止于瓣上肌环。(2)界峭由许多肌束膜分隔的肌束组成,肌束内纤维与界峭长轴平行排列,并向梳状肌发出分支。其中可见P样细胞单个或成群分布,以界峭上部居多。(3)幼兔界峭细胞直径较小,排列密集,肌束周围间质组织少。随着年龄增长,细胞直径和心肌组织胶原含量逐渐增加。老年兔细胞直径和组织胶原含量比成年兔和幼兔明显增加,肌束间及血管周围可见纤维结缔组织增生和脂肪细胞浸润,部分可见局灶纤维化。(4) Cx43在界峭细胞端一端和侧一侧连接上均有表达,各年龄组总的Cx43阳性染色面积占总视野面积的百分比无差别,但其空间分布发生明显改变。幼年兔Cx43大多在细胞的侧一侧连接处表达;成年兔端一端连接比侧一侧连接处表达为多;而老年兔则以端一端连接表达为主,偶有侧一侧连接处表达。(5)超微结构显示界崎细胞端一端可见明显缝隙连接。部分老年兔细胞可见脂褐素,线粒体靖断裂或轻度溶解。以上研究提示:界峭组织中存在局灶异位冲动发放的物质基础一P样细胞,界峭及其毗邻部位的组织解剖特征易于各向异性传导。在一定的病理情况下它们可能是界晴产生和/或参与房性心律失常的物质形态学基础。老龄化时组织结构的改变可能是老年房性心律失常发生率增高的原因。 第二部分:兔界峭组织电生理特性研究。旨在探讨界靖参与房性心律失常的组织电生理基础。具体内容包括:采用标准玻璃微电极技术,研究正常台氏液灌流时界峭和梳状肌组织跨膜细胞动作电位(AP)特征和4林mol/L异丙肾上腺素灌流的影响;观察单纯界晴条标本的自发搏动、记录其自发电活动;与第一部分组织学检查相配对的各年龄段兔各7只,测量界峭的纵向和横向传导速度,并与其连接蛋白43表达的增龄性变化进行相关分析。方法:(l)新西兰大耳家兔12只,