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目的:1.研究紫杉醇、5-FU不同联合方案对Her-2阳性和Her-2阴性胃癌细胞体外增殖的影响,确定最佳用药顺序,比较两种胃癌细胞对化疗的敏感性差异。2.研究抗Her-2单克隆抗体Herceptin对Her-2阳性和Her-2阴性胃癌细胞体外增殖作用的影响,探讨其在胃癌生物治疗中潜在应用价值。3.评价Herceptin联合紫杉醇、5-FU对Her-2阳性和Her-2阴性胃癌细胞是否存在协同抗增殖作用,确定最佳用药顺序,为开辟胃癌分子靶向治疗新途径提供实验依据。4.初步探讨Herceptin抗胃癌细胞的机制。方法:1.采用MTT比色法观察不同浓度紫杉醇、5-FU、Herceptin单独或联合应用对MGC803、N87细胞生长的抑制作用,并利用中效法则判定两药合用的效果。2.采用流式细胞术检测紫杉醇、5-FU、Herceptin单独或联合应用对MGC803、N87细胞周期分布和凋亡的影响以及Herceptin对N87细胞Her-2表达的影响。3.采用Western-blot方法检测Herceptin单独以及联合紫杉醇、5-FU对N87细胞AKT、P-AKT表达的影响。结果:1.在MGCS03和N87细胞上观察到紫杉醇联合5-FU最佳方案是先用紫杉醇24h后用5-FU48h;MGC803细胞对紫杉醇、5-FU联合的同一用药方案敏感性明显强于N87细胞。2.Herceptin单独作用,无论对MGC803还是N87胃癌细胞都没有观察到明显杀伤作用。3.Herceptin联合化疗药(紫杉醇、5-FU)对MGCS03细胞没有疗效提高作用,对N87细胞当先用化疗药(紫杉醇、5-FU),后用Herceptin时有明显的疗效提高作用。4.Herceptin作用于N87细胞48h后明显下调了S期细胞数,下调Her-2蛋白的表达;Herceptin单用或联合化疗药(紫杉醇、5-FU)均能不同程度得抑制N87细胞的P-AKT的表达,对总的AKT表达无影响结论:紫杉醇联合5-FU治疗胃癌可能存在最佳方案和最适宜人群,Herceptin单用于Her-2过表达胃癌细胞没有体外杀伤作用,但是联合紫杉醇、5-FU对Her-2过表达胃癌细胞有明显的杀伤性增强作用而且存在最佳方案。