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在应激过程中，机体除了促进下丘脑-垂体-肾上腺轴分泌促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和糖皮质激素(GC)调节免疫功能外，还能产生另一类应激激素，生长激素(GH)和催乳激素(PRL)，这些激素分泌和合成的调节机制及其在感染、炎症等应激反应中的作用正越来越受到学者们的关注。研究发现，免疫细胞分泌的细胞因子及其受体可在下丘脑、垂体腺中表达，并对垂体细胞的增殖、分化和GH的分泌有一定的调节作用，那么，这些细胞因子对GH的合成有无调节作用?具体的调节机制是怎样的?目前尚未见报道。本研究以大鼠垂体GH3和MtT／S细胞作为垂体分泌GH的细胞，采用酶免疫分析法和荧光素酶报告基因的方法，从细胞和基因分子水平研究细胞因子(包括IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-11、CNTF、TGF-β、激活素)对垂体细胞中人GH(hGH)基因表达(包括转录水平和翻译水平的表达)的调控作用及其机理。 1．含人GH(hGH)基因启动子序列(-484～+30bp)的荧光素酶表达质粒484-Luc2的克隆和稳定转染GH3和MtT／s细胞系的建立：首先把hGH基因调控序列(-484～+30bp)克隆到含荧光素酶报告基因的质粒载体pGL3-Basic中，得到含hGH基因启动子-484～+30bp序列的荧光素酶表达质粒484-luc2。然后把这一质粒用脂质体转染法，转染到垂体GH3和MtT／S细胞中，经筛选药物G418筛选，获得稳定表达荧光素酶的稳定转染GH3和MtT／S细胞系。 2．细胞因子对垂体细胞GH分泌和合成的影响：采用酶免疫分析法，在垂体GH3细胞中加入细胞因子刺激4h后，观察到IFN-γ(10~2和10~3u／ml)、IL-1β(10、10~2、10~3和10~4u／ml)、IL-6(10~2、10~3和10~4u／ml)、IL-11(20nM)、CNTF(10nM)能显著刺激GH分泌，促进GH合成。其中IL-6的刺激作用最强，10~4u／ml的IL-6能使GH分泌增加到对照组440％，GH合成增加到对照组的418％。而TGF-β(5nM)和激活素(5nM和50nM)能明显减少GH分泌，抑制GH合成。50nM的激活素分别抑制GH分泌和合成到对照组的56％和59％。在MtT／S细胞中也获得了与GH3细胞相似的实验结果。 3．细胞因子对垂体细胞中hGH基因启动子的影响：含有hGH基因启动子序列和荧光素酶报告基因的质粒，其荧光素酶的表达受hGH基因启动子活性的控制。