【摘 要】
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化石资源日益枯竭,油品需求量与资源短缺的矛盾日益尖锐,环境恶化日趋严重,积极开发替代化石燃料的可再生新能源迫在眉睫。利用富含碳水化合物的可再生资源,通过酶催化转化或
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化石资源日益枯竭,油品需求量与资源短缺的矛盾日益尖锐,环境恶化日趋严重,积极开发替代化石燃料的可再生新能源迫在眉睫。利用富含碳水化合物的可再生资源,通过酶催化转化或微生物发酵手段来生产能源产品和化学制品,将是可持续发展的必然趋势之一。本论文针对提高产油酵母菌转化碳水化合物生产微生物油脂效率所涉及的核心技术进行了研究。通过观察真菌群体感应分子(色醇、对羟基苯乙醇、苯乙醇、法尼醇、茴香脑和香叶醇)存在下圆红冬孢酵母(R. toruloides)Y4#菌的细胞形态变化发现真菌群体感应分子可以调控细胞从酵母到菌丝体的形态转变。对羟基苯乙醇在不同细胞密度和芳香醇浓度下抑制形态过渡;色醇、法尼醇或茴香脑在一定的细胞密度和芳香醇浓度下促进形态过渡;苯乙醇与香叶醇对形态转变的影响会因细胞密度和芳香醇浓度的不同而有所不同。实验未观察到真菌群体感应分子调控斯达氏油脂酵母(L. starkeyi)Y2#菌细胞形态的变化。实验发现对羟基苯乙醇浓度与L. starkeyi Y2#菌生物量之间存在生长依赖型关系,且当菌体达到稳定期时对羟基苯乙醇浓度达到最高。根据细菌群体感应特点,初步推断对羟基苯乙醇可能为L. starkeyi Y2#菌的群体感应分子。初步考察了真菌群体感应分子对L. starkeyi Y2#菌油脂发酵的影响。结果表明,在对数生长期添加色醇、对羟基苯乙醇或苯乙醇可以明显提高菌体生长速率、底物转化率和油脂生产强度。在不同时间添加茴香脑或香叶醇对油脂发酵的影响不明显。法尼醇明显抑制细胞生长与油脂积累。实验发现,在接种后36 h添加100μM色醇,发酵终点生物量、脂肪系数和油脂量分别比对照组提高5.4%、13.5%和13.2%,发酵时间缩短17.9%。气相色谱分析表明,添加真菌群体感应分子对菌油脂肪酸组成及其相对含量无显著影响。离子色谱分析表明,添加色醇对发酵终点培养基中各有机酸组成及其相对含量无显著影响。实验结果有助于建立调控油脂发酵的新策略,具有重要的理论和工程应用意义。
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