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目的肺动脉高压是慢性肺部疾病常见并发症。肺动脉平滑肌细胞异常增殖引起的肺血管重塑在肺动脉高压的形成机制中起着关键作用。虽然治疗潜在的肺部疾病可以降低轻度的肺动脉压力升高,但终末期肺病的肺动脉高压仍难以逆转。目前特发性肺动脉高压和慢性肺病所致肺动脉高压的治疗药物在临床试验中并未取得理想的效果。有研究表明中药丹参的有效成分-丹参酮ⅡA用于治疗肺动脉高压可以降低平均肺动脉压力,缓解临床症状、增加运动耐量,但具体机制不明。本研究通过观察丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinoneⅡA sulfonate,STS)干预对低氧状态下大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖的影响并进一步探讨其分子机制。方法(1)大鼠肺动脉平滑肌细胞株传代后随机分为常氧组、常氧+STS组(5ng/ml、10ng/ml、20 ng/ml)、低氧组、低氧+STS组(5 ng/ml、10ng/ml、20 ng/ml)。用CCK-8分别测定各组的吸光度值代表肺动脉平滑肌细胞的增殖率。(2)同上述培养方法,将肺动脉平滑肌细胞随机分为常氧组、低氧组和低氧+STS组(10ng/ml),通过荧光定量PCR法分别测定各组细胞mTOR、eIF2α、c-myc mRNA的相对表达量。(3)培养方法与上述一致,常氧和低氧下将肺动脉平滑肌细胞随机分组培养,设常氧组、低氧组、低氧+STS组(10 ng/ml)、低氧+雷帕霉素组(20 nmol/L),采用蛋白质印迹法检测各组细胞mTOR、p-mTOR、eIF2α、p-eIF2α、c-myc蛋白表达量。结果(1)与常氧组比较,低氧组细胞的增殖率明显升高,差异有统计学意义(P﹤0.05);与低氧组比较,STS干预后的低氧组细胞增殖率明显降低,差异有统计学意义(P﹤0.05)。然而,与常氧组比较,常氧+STS组细胞增殖率无明显差别,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)通过PCR检测分析显示:与常氧组比较,低氧组细胞mTOR、eIF2α和c-myc mRNA的相对表达量明显升高,差异有统计学意义(P均﹤0.05);与低氧组比较,低氧+STS组的三种mRNA相对表达量下降,其差异有统计学意义(P均﹤0.05)。(3)Western blotting法检测各组细胞蛋白表达:与常氧组比较,低氧组细胞mTOR、p-mTOR、eIF2α、p-e IF2α、c-myc蛋白表达均显著升高,差异有统计学意义(P均﹤0.05);低氧+STS组和低氧+雷帕霉素组mTOR、mTOR、t-eIF2α、p-eIF2α、c-myc蛋白表达较低氧组均升高,差异有统计学意义(P均﹤0.05);而低氧+雷帕霉素组与低氧+STS组的蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论(1)低氧可以上调mTOR、eIF2a、c-myc蛋白而促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,从而诱发肺动脉高压。(2)丹参酮ⅡA磺酸钠可以经mTOR信号通路,减少eIF2a及c-myc蛋白表达水平,抑制低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,对肺动脉高压有潜在的治疗作用。