第一部分Cop-1诱导自身免疫对大鼠高眼压模型的视神经保护作用　　 目的:探讨Cop-1诱导的自身免疫对大鼠高眼压模型的视神经保护作用及可能机制。　　 方法:高眼压大鼠随机分为两组,一组皮下注射200μgCop-1,另一组注射PBS作对照。免疫后不同时间,荧光金逆行标记进RGCs计数。免疫组织化学方法观察T淋巴细胞在视神经及视网膜的聚集情况。　　 结果:免疫后10d、17d、24d、31d,COP-1组高眼压眼RGCs存活数目(mm-2为2654.28±11.66、2617.05±17.37、2587.99±205.67、2393.56±15.38,PBS组为2582.70±69.05、2357.40±36.63、2276.83±339.74、2129.04±17.42.从第17d起到观察时间止点31dCop-1组高眼压眼存活的RGCs数目较PBS组高眼压眼多。从17d起Cop-1组高眼压眼视神经上聚集的T细胞比PBS组少;而从第3d起Cop-1组视网膜上聚集的T细胞比PBS组多。　　 结论:Cop-1对大鼠高眼压模型的RGCs具有保护作用。高眼压造成的损害引起视神经及视网膜处T细胞的聚集,Cop-1能增加聚集于视网膜上的T细胞数量,这可能与Cop-1的视神经保护作用有关。　　 第二部分Cop-1反应性T细胞对大鼠高眼压模型的视神经保护机制目的探讨Cop-1反应性T细胞对大鼠高眼压模型的视神经保护机制。方法0.2mgCop-1注入正常大鼠后肢足垫进行免疫,另一组注入PBS作对照,免疫后10天,取出双侧腹股沟淋巴结,进行Cop-1反应性T细胞(Tcop-1)培养。T细胞腹膜内注射被动免疫高眼压大鼠,在免疫后14d,用荧光金逆行标记RGCs,7d后观察RGCs的存活情况。RT-PCR)分析T细胞细胞因子基因表达情况。用ELISA法测定T细胞上清液的神经营养因子的浓度。24只高眼压大鼠随机分为两组,造模后7天,一组(n=12)皮下注射0.2mgCop-1,另一组注射PBS作为对照。免疫后21天,取出高眼压眼视网膜。另取正常大鼠及Cop-1免疫的正常大鼠(免疫21天后)各12只,取出右眼视网膜,用免疫印迹的方法测定TrkB的表达。结果在免疫后21天,Cop-1组RGCs存活数目较PBS组多(t=8.0204,p＜0.01)。Cop-1免疫后,CD4+T细胞数日增加,γ-IFN的mRNA表达量较PBS组高,而TL-4在两组问的表达差别无统计学意义。Tcop-1在Cop-1刺激后分泌的脑源性神经营养因子BDNF浓度是3385.42±836.33pg/ml,单纯Tcop-1分泌量1026.24±135.10pg/ml,而从未受过抗原刺激的T细胞(TPBS)为19.87±71,20pg/ml。前者分泌量远大于后两者(P＜0.01,P＜0.01,单因素方差分析,Bonferroi)。TrkB在正常视网膜上即常规表达,在高眼压状态下,TrkB在视网膜上的表达量增加,是正常大鼠表达量的207.40±1.08％(t=-0.138172,p＜0.01,单因素方差分析,Bonferroni);Cop-1免疫正常大鼠后,TrkB的表达量是正常大鼠的246.39±0.30％(t=-0.188324,p＜0,01,单因素方差分析,Bonferroni)。Cop-1免疫高眼压模型大鼠后,TrkB的表达量增加最多,为正常大鼠的341,74±1.57％。　　 结论：Cop-1反应性Thl细胞是发挥视神经保护作用的重要细胞,保护机制之一是通过Tcop-1在局部分泌BDNF及增加BDNF受体TrkB的表达来实现。