论文部分内容阅读
杨树是杨柳科(Salicaceae)杨属(Populus L.)树种的统称，杨属植物共有100多个种，我国就有53个种之多。近年来，随着杨树育种工作的发展，杨树育种工作者先后引进和选育出的杨树新品种就有50个之多，但由于同一大类不同无性系间杨树形态特征差异很小，因此很难通过形态特征进行区分，这样不仅影响到品种的进一步遗传改良，也影响到良种的正确应用。因此，应用分子标记技术对杨树品种(无性系)鉴定进行研究，建立可靠的杨树品种(无性系)分类和鉴定体系具有重要的意义。本文用SSR和ISSR2种分子标记技术对5个杨树品种（无性系）进行了鉴定及遗传相关性研究。主要研究结果如下：1.比较CTAB法和SDS法2种杨树基因组DNA的提取方法，结果表明，SDS法提取的基因组DNA较好，可满足SSR和ISSR2种分子标记的扩增要求。2.比较5种杨树叶片的保存方法，结果表明，-80℃冻存、硅胶干燥和室温自然晾干3种保存方法保存效果较好，所以，可以根据实际情况，采用合适的保存方法。3.从36对SSR引物中共筛选出12条扩增条带清晰、多态性好的引物。用筛选出的引物对5个杨树品种（无性系）进行扩增，共扩增出条带125条，其中多态性条带111条，多态性条带率88.8%，片段长度介于80bp～1000bp之间。从30条ISSR引物中筛选出10条多态性高的引物，对5个杨树品种（无性系）进行扩增，共得到扩增条带102条，多态性条带73条，多态性条带率71.57%，片段长度介于100bp～1000bp之间。4.利用3对SSR引物和4个ISSR引物分别建立了5个杨树品种（无性系）的DNA指纹图谱，用于杨树品种（无性系）的品种鉴定。5. SSR分析中各杨树品种（无性系）间的相似系数分布在0.440～0.736之间，平均相似系数为0.573；2个杂交新品种与父本84K的相似系数较大，相似系数分别为0.632和0.688。ISSR分析中杨树各品种（无性系）间的相似系数分布在0.412～0.883之间，平均相似系数为0.636；2个杂交新品种与父本84K的亲缘关系较近，相似系数分别为0.735和0.883。6.综合SSR和ISSR2种分子标记进行了遗传相关性分析，各杨树品种（无性系）间的相似系数分布在0.467～0.775之间，平均相似系数为0.601，聚类树状图结果与ISSR分子标记的结果相近。