目的Toll样受体(TLRs)作为先天免疫分子在多种恶性肿瘤中表达,通过识别并结合病原体相关分子来诱导各种细胞因子和炎性因子的释放,从而在免疫炎症反应介导的肿瘤的发生进展中发挥重要作用。本研究旨在探讨TLRs启动子区和3’UTR区的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)对结直肠癌患者易感性的影响。方法本研究采取病例对照研究的研究策略,病例组为来自2008年至2016年唐山市工人医院和唐山市人民医院经组织病理学确诊,且采血前均未接受放化疗的410例结肠癌患者与480例直肠癌患者。随机选取的同一时期在唐山地区进行健康体检的410例和480例正常个体分别作为结肠癌和直肠癌的对照组。通过数据库db SNP以及Ensembl基因多态性数据信息和相关的文献资料,筛选在癌症发生发展过程中起重要作用的Toll样受体家族基因和位于启动子区或3’非翻译区的单核苷酸多态性位点。根据TRANSFAC和SNPinfo Web Service软件对筛选出的Toll样受体家族基因(TLR3,TLR4,TLR5,TLR7)的启动子区和3’非翻译区的SNP位点进行功能预测,最终确定可能对基因表达具有影响的SNP位点。基因分型采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术和Taqman探针法。利用荧光素酶报告基因实验分析基因启动子区遗传变异对转录活性的影响。统计分析使用SPSS23.0。病例组和对照组中研究对象的基本特征使用卡方检验。遗传变异与结直肠癌发病风险的关系用Logistic回归模型进行分析并计算出OR值及95%可信区间。两独立样本t检验比较荧光素酶报告基因活性。结果根据生物信息学分析的结果,筛选出最有可能具有功能影响的5个SNP位点,并分析遗传变异与结直肠癌发生风险的关系。在结肠癌中,TLR3 rs5743303、TLR4 rs7869402、TLR5 rs1640816和TLR7 rs3853839的基因多态性与结肠癌发病均无相关性,仅有TLR4 rs1927914遗传变异中AG/GG基因型携带者能够降低结肠癌易感性风险(OR=0.68,95%CI=0.50-0.91)。在分层分析中,TLR4 rs1927914AG/GG基因型在年轻人(OR=0.52,95%CI=0.34-0.81),男性(OR=0.58,95%CI=0.38-0.87),非吸烟者(OR=0.58,95%CI=0.41-0.83)和非饮酒者(OR=0.66,95%CI=0.46-0.93)中显示出降低结肠癌发病风险。在直肠癌中,TLR4 rs1927914、TLR4 rs7869402、TLR5 rs1640816和TLR7 rs3853839的基因多态性与直肠癌的发病均无相关性,仅有TLR3 rs5743303 A>T变异与直肠癌易感性相关,与携带rs5743303 AA基因型的个体相比,携带AT/TT基因型个体的直肠癌发病风险显著升高(OR=1.43,95%CI=1.07-1.91)。分层分析显示,TLR3 rs5743303至少携带一个T等位基因的男性(OR=1.47,95%CI=1.01-2.11)和年轻受试者(OR=1.64,95%CI=1.08-2.47)直肠癌发病风险升高。对吸烟和饮酒的分层分析,我们发现与AA基因型相比,携带AT/TT基因型可以增加吸烟和饮酒者的直肠癌易感性。荧光素酶报告基因实验显示在不同结直肠癌细胞系(LOVO/HCT116)中,携带TLR4 rs1927914 A等位基因的报告基因转录活性为携带G等位基因的5.43和2.07倍(P<0.05),而TLR3 rs5743303 A>T遗传变异与TLR3转录活性无关。结论TLR4 rs1927914 A>G遗传变异可影响TLR4的转录活性,从而降低结肠癌的发病风险。TLR3 rs5743303 A>T遗传变异可增加直肠癌的易感性。图2幅;表8个;参236篇。