血小板衍生生长因子A(PDGFA)为血小板衍生生长因子之一,可由多种细胞产生。其可与细胞膜表面高度特异受体PDGFRA结合,从而激活PDGF/PDGFR通路,发挥相应的生物学效应。现有研究表明PDGFA蛋白在多种癌细胞的增殖和迁移过程中起重要作用。鹿茸的快速生长和再生是自然界绝无仅有的,也因此成为理想的再生生物学研究对象。对它快速增殖的研究也可能成为临床治疗肿瘤的新切入点。本研究根据Genbank中牛的基因序列,设计了梅花鹿PDGFA基因的同源引物,并在引物两端分别加入酶切位点(HindⅢ、BamH Ⅰ)。采用RT-PCR技术获得了梅花鹿鹿茸组织PDGFA基因cDNA序列,通过对测序结果分析发现,获得的PDGFA基因cDNA序列长663bp,编码196个氨基酸。经对比发现梅花鹿PDGFA蛋白与白尾鹿、家牛、山羊同源性较高,分别为98%、97%、96%,证明成功克隆了梅花鹿的PDGFA基因。本试验构建pEGFP-C1-PDGFA重组质粒,用pEGFP-C1-PDGFA真核表达载和pEGFP-C1空载体分别瞬时转染293T细胞,并在荧光显微镜下观察,可见大量绿色荧光,转染效率为60%-70%。对转染空载体和pEGFP-C1-PDGFA的细胞提取RNA后反转录,使用荧光定量PCR检测,发现转染pEGFP-C1-PDGFA组PDGFA基因表达量是转染pEGFP-C1空载体组的约280倍。经荧光定量PCR检测发现,当PDGFA基因在293T细胞中过表达时,SPHK2,STAT5A,STAT5B的表达水平有显著上升(P<0.01)。