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目的:构建携带人FBP17基因真核重组质粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17,并转染人正常肝细胞LO2,验证已转染重组质粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17的LO2高表达FBP17,为FBP17相互作用蛋白研究打下坚实的基础。方法:( 1 )构建重组质粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17。通过酶切pEGFP-C1-FBP17质粒,产物纯化后与p3×FLAG-CMV-10载体进行连接反应,构建p3×FLAG-CMV-10/FBP17真核重组质粒。(2)脂质体法将真核重组质粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17转染人正常肝细胞LO2。(3)应用RT-PCR和Western Blotting检测验证真核重组质粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17在人正常肝细胞LO2中高表达, XTT法检测其对细胞存活率的影响。结果: ( 1 )成功地构建真核表达重组质粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17。( 2 )成功将真核表达重组质粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17转染人正常肝细胞LO2,并证实已转染的重组质粒p3×FLAG-CMV-10/FBP17的LO2高表达FBP17蛋白。