t（8；21）（q21；q22）是急性髓系白血病中常见的染色体易位，这种易位主要导致AML1-ETO融合基因的产生以及AML-M2的发生，约占AML-M2b的90％。EEN基因则是作为MLL基因的融合伙伴基因在一例急性单核细胞白血病病人中首次克隆。在MLL-EEN融合蛋白中，保留了大部分的EEN蛋白。相关的研究表明，MLL基因的融合伙伴基因对MLL融合基因的致白血病作用是必须的，这说明，融合伙伴EEN在白血病发生中至关重要。在本研究中，筛选了不同细胞株中EEN的表达情况。发现EEN在Kasumi-1细胞中的表达比其他细胞株有明显的升高。于是比较了携带不同融合基因的白血病患者骨髓cDNA中EEN的表达量。发现具有AML1-ETO融合基因的M2b患者的EEN的表达量也有上调。继而，在松甾酮A（PA）诱导表达AML1-ETO的U937细胞株中，通过RT-PCR和Western证实，EEN的RNA和蛋白质水平都随着AML1-ETO的诱导表达而升高。为了研究AML1-ETO与EEN之间的调控关系以及在白血病发生过程中的作用，分析了EEN基因的启动子和相关的转录调控机制。首先利用RNA酶保护试验确定了EEN基因的转录起始位点位于ATG起始密码子上游144bp处。通过对EEN启动子区可能的转录元件分析，找到了Sp1和一个AML1的潜在的结合位点（TGCGGT）。随后，利用染色质免疫共沉淀证实AML1-ETO可以通过这一结合位点与EEN的启动子结合。通过这一结合，AML1-ETO可以异常激活EEN基因的转录，而AML1则没有这个作用。由于过表达的AML1不具有激活EEN基因的功能，所以，说明其他的转录因子对EEN的表达发挥了主要作用。这样通过EMSA和转录报告试验研究了Sp1对EEN基因的调控，证实Sp1可以结合到EEN的启动子区，并显著激活EEN基因的转录。 EEN基因在染色体上与CAF1基因呈头对头的排列方式，所以，AML1-ETO可能可以调变CAF1基因的转录。发现，Sp1的结合位点序列与已知的绝缘子序列具有同源性。将该序列插入SV40的启动子和增强子之间，通过报告试验证实该序列在EEN基因方向上，可以激活EEN基因的转录。而在CAF1基因方向上，该位点具有阻断AML1-ETO对CAF1基因的转录激活作用，发挥绝缘子的作用。RT-PCR的结果也显示，在松甾酮A（PA）诱导表达AML1-ETO的U937细胞株中，CAF1基因的表达与AML1-ETO的含量没有具体时相联系。这说明，该绝缘子在体内具有活性。同时，在该诱导表达体系中，Sp1蛋白的含量没有明显的变化。同时，研究了EEN基因的肿瘤转化能力，高表达EEN基因的稳转细胞株HL60增殖能力增加，高表达EEN基因的稳转细胞株NIH-3T3注射于裸鼠皮下可以导致肿瘤。初步的分子机制的研究表明，EEN能够增强原癌基因AP-1的活性。这提示，EEN的高表达的分子机制可能是通过激活AP-1途径来发挥作用的。为了进一步研究EEN在M2b白血病发生中的作用，还建立了RNA干扰的Kasumi-1和HL60稳定转染细胞模型，为进一步的工作打下了良好的基础。