【摘 要】
:
黄曲霉是一种土壤腐生真菌,在农产品收获时伴随着农产品进入储藏、运输、加工等环节,条件适宜时即可产生黄曲霉毒素。因此,加强源头控制,研究建立黄曲霉污染防控技术意义重大。近年来黄曲霉污染生物防控研究发展迅速,常见的有细菌、放线菌和霉菌,为了挖掘新的高效安全生物防控菌,本文研究探明了阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)3J1EC对产毒黄曲霉菌产毒的抑制作用,明确了其生物安全性,并从转录
【基金项目】
:
国家农产品质量安全风险评估重大项目(GJFP2014006); 国家重点研发计划(我国食源性致病微生物科学大数据库构建 2017YFC1601201,食源性致病微生物新型危害因子和特异性检测新靶标挖掘 2017YFC1601202)和花生黄曲霉毒素污染风险评估(GJFP2019003);
论文部分内容阅读
黄曲霉是一种土壤腐生真菌,在农产品收获时伴随着农产品进入储藏、运输、加工等环节,条件适宜时即可产生黄曲霉毒素。因此,加强源头控制,研究建立黄曲霉污染防控技术意义重大。近年来黄曲霉污染生物防控研究发展迅速,常见的有细菌、放线菌和霉菌,为了挖掘新的高效安全生物防控菌,本文研究探明了阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)3J1EC对产毒黄曲霉菌产毒的抑制作用,明确了其生物安全性,并从转录组水平初步解析了阴沟肠杆菌3J1EC抑制产毒黄曲霉菌产毒的分子机制。主要研究结果如下:1.研究发现了阴沟肠杆菌3J1EC对产毒黄曲霉菌产毒具有强抑制作用。找出黄曲霉菌孢子萌发的时间点和黄曲霉毒素开始形成的时间点,明确了不同时间黄曲霉毒素含量的变化规律。在此基础上将产毒黄曲霉3.4408及6种花生果际土壤中分离产毒黄曲霉菌株分别与阴沟肠杆菌3J1EC于产毒培养液中共同培养,测定共同培养液中黄曲霉毒素含量。结果表明,接种的黄曲霉菌分生孢子在8 h全部萌发,72 h开始在培养液中产生黄曲霉毒素;阴沟肠杆菌3J1EC处理的7种黄曲霉菌株,培养液中产生的黄曲霉毒素含量减少95.9%~99.5%,并且黄曲霉菌3.4408的菌体干重减少54%。表明阴沟肠杆菌3J1EC能抑制黄曲霉菌生长及产毒。2.解析了阴沟肠杆菌3J1EC抑制产毒黄曲霉菌产毒的分子机制。采用RNA-Seq技术,以黄曲霉菌孢子(0 h)作为对照组,分别以两组黄曲霉菌菌丝(8 h、72 h)作为处理组进行转录组测序。明确黄曲霉孢子(0 h)、菌丝(8 h)和菌丝(72 h)三个时间点的黄曲霉菌3.4408菌体转录组变化及阴沟肠杆菌3J1EC处理前后黄曲霉菌3.4408菌体在72 h的转录组表达差异。黄曲霉菌3.4408菌丝(8 h)的LaeA、aflR和aflS在8 h呈上调表达,LaeA的差异倍数为3.1,aflR的差异倍数为2.34,aflS的差异倍数为1.26。黄曲霉菌3.4408菌丝(72 h)的LaeA、aflR和aflS在72 h呈上调表达,LaeA的差异倍数为3.79,aflR的差异倍数为4.02,aflS的差异倍数为2.91。阴沟肠杆菌3J1EC处理的黄曲霉菌3.4408的laeA、aflR和aflS在72 h呈下调表达,LaeA的差异倍数为-1.86,aflR的差异倍数为-1.91,aflS的差异倍数为-2.98。研究结果表明,阴沟肠杆菌3J1EC可能通过降低LaeA、aflR和aflS等产毒相关基因的表达而抑制黄曲霉菌产毒。研究结果为深度开发利用阴沟肠杆菌3J1EC防控农产品黄曲霉毒素污染提供了科学依据。3.研究明确了阴沟肠杆菌3J1EC的生物安全性。研究了阴沟肠杆菌3J1EC急性腹腔注射致病性、急性经口毒性和急性经皮毒性。急性腹腔注射致病性试验按照微生物肥料生物安全通用技术准则(NY/T 1109-2017)进行操作,急性经口毒性和急性经皮毒性试验按照农药登记毒理学试验方法(GB/T 15670.5-2017)进行操作。该受试物急性腹腔注射致病率为0;对雌性大鼠经口LD50>5000mg/kg·BW;对雌、雄性大鼠经皮LD50>2000mg/kg·BW。该受试物急性致病性属无致病性、急性经口毒性属微毒、急性经皮毒性属低毒级别。结果表明阴沟肠杆菌3J1EC符合微生物肥料的要求。
其他文献
1.烟粉虱是田间作物和温室中最具破坏性的害虫之一。本研究旨在4个不同温度条件下(20、24、28和32°C),通过表面喷洒的方式评估2种白僵菌菌株(BB-72和BB-252)和1种蜡蚧轮枝菌(V-2)对烟粉虱的体外杀虫活性。使用三种不同的处理进行生物测定,分别包括真菌菌株BB-72,BB-252和V-2的分生孢子浓度和滤液,以及它们的二元组合。处理一:将取每种真菌菌株的1.5 mL培养滤液进行生物
食蚜蝇(双翅目:食蚜蝇总科)是世界范围内广泛分布的重要经济昆虫,大约1/3种类的幼虫捕食蚜虫等害虫。同时,其成虫大多具有访花的习性,是继蜜蜂之外的第二大类传粉昆虫。国外研究已表明多数食蚜蝇尤其是捕食性食蚜蝇具有远距离迁飞性,且迁飞对传粉和生防功能有重要的促进作用。本文以我国常见种类黑带食蚜蝇Episyrphus balteatus(De Geer)为研究对象,利用高空测报灯系统监测了渤海湾跨海迁飞
蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)和蛋白酪氨酸激酶(PTKs)基因能够调节昆虫胰岛素信号通路、细胞生长,生理代谢、基因转录和免疫响应。昆虫细胞的信号转导、增殖、分化和细胞间通讯也与PTPs和PTKs有关。为了了解ILP途径介导的亚洲小车蝗(Oedaleus asiaticus Bey-Bienko)发育阶段,在前期试验中,采用非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶PTPN4和蛋白酪氨酸激酶5的dsRNA与对照(ddH
桃蚜(Myzus persicae)是危害番茄和黄瓜的主要害虫之一,常规的防治方法是使用化学农药。在我们的研究中,我们从短小芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)A60中分离了一个广谱的蛋白激发子(PeBL1),可以诱导番茄和黄瓜产生对桃蚜的免疫防卫反应。与阳性对照(ddH2O)和阴性对照(70.58μg mL-1,50 mM Tris-HCl,pH 8.0)相比,针对番
修尾蚜是一种危害广泛的农作物害虫,昆虫病原真菌蜡蚧轮枝菌(V.lecanii)和球孢白僵菌(B.bassiana)是一种对环境友好、靶标特异、能够有效防治多种刺吸式昆虫的生物农药。本研究测定了两株球孢白僵菌(B76和B252)和两株蜡蚧轮枝菌(L2和L5)对豆蚜的防治作用。用B76、B252、L2和L5及其二元组合(L2+B76、L2+B525、B76+L5和L2+B76+B252+L5)的滤液和
水稻生长发育过程中会受到多种病害的影响,其中条纹叶枯病在水稻产区多次间歇性暴发,对水稻的生产构成严重威胁。该病害常发生于温带和亚热带地区,21世纪初在中国稻麦轮作区引起高达30%-40%的减产。水稻条纹叶枯病的病原是水稻条纹病毒(RSV),该病毒依靠介体灰飞虱(SBPH,Laodelphax striatellus)以持久增殖的方式水平传播,并且还能经过灰飞虱的卵进行垂直传播。灰飞虱不仅可以取食水
了解细胞命运决定的机制是细菌发育生物学的一个挑战。同基因型群体中的细胞分化使得细胞亚群产生分工,以便细菌可以在不利的条件下生存。Bt是一种产芽胞的细菌,在形成芽胞的细胞中产生杀虫晶体蛋白。Bt LM1212菌株表型独特,能产生两类主要的细胞亚群:一类细胞亚群仅产生芽胞而不产生晶体;另一类细胞亚群仅产生晶体而不产生芽胞。前期研究筛选到一种新的转录因子CpcR可能影响分化细胞中晶体的产生。本文针对转录
羊乳的凝乳能力差,加工酸奶后会导致酸奶乳清析出、干酪得率显著降低。超声处理是一种非热加工技术,广泛应用于食品加工行业中,可有效起到杀菌、均质、乳化、改性等作用。近年来,通过超声加工技术改善羊乳凝乳能力成为研究热点。本文开展了低强度(150-400 W)和高强度(2000-4000 W)超声处理对羊乳理化、微生物及蛋白质结构的影响,研究了超声对羊乳酶凝胶流变学特性和微观结构的影响,进一步评价了超声处
羊乳的凝乳能力相对较差,加工酸奶后会导致酸奶乳清析出,奶酪得率降低,给加工企业带来不小的经济损失。目前,已采用多种方法改善羊乳的凝乳特性,但有关于超高压处理改善凝乳的研究报道较少。在不同贮藏温度条件下(25℃、4℃),研究了不同超高压(200-500 MPa)对原料羊乳理化性质的影响。在25℃条件下贮藏的原料羊奶,与未处理的样品相比,经过超高压处理后蛋白质构象发生了变化,蛋白质沉降系数发生改变、p
目前无麸质马铃薯馒头的感官和风味特性亟待改善,且缺乏生产马铃薯馒头的专用发酵剂。本研究首先通过比较蒸、煮和高静水压等不同预处理对发酵马铃薯的微生物多样性、营养和功能组分的影响,筛选出最佳的预处理方法;其次通过菌株分离、培养和分子生物学鉴定,筛选出发酵马铃薯中的优势乳酸菌和酵母菌;然后通过研究优势菌株的复配比例对无麸质马铃薯馒头的理化、营养和风味特性的影响,优化出复合发酵剂中菌株的最佳比例;最后通过