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罗非鱼是我国主要养殖经济品种,据统计2007年我国罗非鱼总产量113万吨,2008年虽受寒灾影响,但产量没有下降,罗非鱼总产量高达121万吨,占世界总产量的48.4%。随着加工产业的快速发展,加工生产过程产生的大量下脚料——鱼头、鱼骨、鱼皮、鱼鳞、鱼鳍、内脏等,这些下脚料中含有丰富的蛋白资源,其中鱼皮、鱼鳞中含有大量的胶原蛋白。本研究以罗非鱼皮为原料,分别探讨热水提取、酸提取、酶提取等鱼皮胶原蛋白最佳提取工艺,初步将超声波应用于胶原蛋白提取,将罗非鱼鱼胃蛋白酶代替市售胃蛋白酶用于酶法提取胶原蛋白,既节约成本,又减少了污染;此外论文还就四种提取方法所得胶原蛋白的性质进行研究并与猪皮胶原蛋白性质进行比较;同时探讨了酸法提取胶原蛋白和鱼胃蛋白酶提取胶原蛋白中重金属残留状况。旨在为食品、生物、医药、化妆品等领域的应用提供基础数据。
研究结果表明几种提取方法得到的最佳工艺为:
(1)热水法提取罗非鱼皮胶原蛋白的最佳工艺为:4℃条件下0.213M盐酸浸泡鱼皮21min(料液比1:20,m/V)后,用蒸馏水(料液比1:7,m/V)于42℃水浴浸提12.6h,胶原蛋白含量达293.018mg/G。胶原蛋白成品率为31.3%。
(2)酸法提取罗非鱼皮胶原蛋白条件为:4℃下10倍体积NaCl(3%)溶液浸泡鱼皮6h后,用30倍体积柠檬酸(0.1M)提取48h。胶原蛋白成品率为29.5%
(3)超声波辅助提取罗非鱼皮胶原蛋白的最佳工艺为:4℃下10倍体积NaCl(3%)溶液浸泡鱼皮6h后,10℃下加3%胃蛋白酶,15倍体积的柠檬酸(0.1M)经90W超声波处理6.5h。胶原蛋白成品率为30.3%。
(4)罗非鱼胃蛋白酶提取罗非鱼皮胶原蛋白最佳工艺为:4℃下10倍体积NaCl(3%)溶液浸泡鱼皮6h后,加入12倍体积的柠檬酸(0.1M)和5倍体积的鱼胃蛋白酶提取液在4℃下提取23h。胶原蛋白成品率为30.6%。
胶原蛋白紫外光谱最大吸收峰在220~232nm之间,含两条α链(α1和α2)和它们的聚合链β,符合I型胶原蛋白特征;所制得的几种胶原蛋白氨基酸组成没有明显的差别,特征性氨基酸羟脯氨酸和脯氨酸含量在16~19%之间,鱼皮胶原蛋白的羟脯氨酸低于猪皮;热水法提取胶原蛋白的凝胶强度最高;酸法提取胶原蛋白的特性黏度最高;几种鱼皮胶原蛋白的变性温度都在31℃附近,明显低于猪皮胶原蛋白的热变性温度(37℃附近);热水法提取胶原蛋白的等电点(pI5.9)低于其它几种胶原蛋白(p17附近);吸湿性和保湿性大小依次是酸法提取胶原蛋白>超声波辅助提取胶原蛋白>鱼胃蛋白酶提取胶原蛋白>热水提取胶原蛋白;几种胶原蛋白都有较好的乳化性、乳化稳定性、起泡性、起泡稳定性,热水法提取胶原蛋白与其它几种相比相对较低;酸法提取胶原蛋白吸油性最好,而热水法提取胶原蛋白的吸油性相对较低。
经分析可知酸法提取胶原蛋白和鱼胃蛋白酶提取胶原蛋白中铅、镉、铬含量分别为0.2365、0.0148、0.664和0.2655、0.0202、0.702mg/kg。均符合国家食品、化妆品卫生标准。