淫羊藿苷对NB4白血病细胞株抑制增殖和诱导凋亡作用及机制研究

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目的:研究淫羊藿苷对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,探讨淫羊藿苷抗肿瘤作用机理,为淫羊藿苷抗肿瘤临床应用提供理论依据。方法:1、采用MTT比色法观察不同浓度淫羊藿苷(4、8、16、32、64μmol/L)作用不同时间(24h、48h、72h)后,NB4细胞的增殖变化;2、用流式细胞技术分析不同浓度淫羊藿苷(8、16、32、64μmol/L)作用48h,对NB4细胞周期阻滞的影响。3、用流式细胞技术分析不同浓度淫羊藿苷(4、8、16、32、64μmol/L)作用48h,对NB4细胞凋亡的影响;4、采用Western blot方法分析不同浓度淫羊藿苷(8、16、32、64μmol/L)作用48h后,NB4细胞Bax蛋白、Bcl-2蛋白表达的影响。5、统计学方法:所有数据均采用SPSS17.0中的单因素方差分析ANOVA统计法分析,P<0.05认为有统计学差异,P<0.01有显著统计学差异。统计结果用x±s表示。结果:1、MTT实验证明淫羊藿苷抑制NB4细胞增殖:4、8、16、32、64μmol/L的淫羊藿苷对NB4细胞有明显的抑制作用,与对照组比较有统计学差异(P<0.05),抑制作用呈剂量和时间依赖性2、淫羊藿苷可诱导NB4细胞周期阻滞,经8、16、32、64μmol/L的淫羊藿苷作用48h后,各实验组与对照组相比,G1期细胞增多(P<0.05),而S期细胞减少(P<0.05)。3、淫羊藿苷可诱导NB4细胞凋亡,NB4细胞经4、8、16、32、64μmol/L作用48h后,其细胞总凋亡率分别为6.52%,10.07%,15.41%,25.18%,29.41%,其中864μmol/L与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),呈剂量依赖性。4、8、16、32、64μmol/L淫羊藿苷作用于NB4细胞48h后,Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)Bax/Bcl-2的比值增加。结论:1、淫羊藿苷能抑制NB4细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性。2、淫羊藿苷可将NB4细胞周期阻滞于G1期。3、淫羊藿苷能以剂量依赖方式诱导NB4细胞凋亡。4、淫羊藿苷可使NB4细胞中Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,考虑其诱导凋亡机制和线粒体途径有关。
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