毛细管电泳（CE）是一种以毛细管为分离通道,高压直流电场为驱动力,依据样品各组分的淌度和分配行为等特性而实现分析物分离的纳升级液相分离技术,具有分析速度快、分离效率高、分离模式多以及样品和试剂消耗量少等诸多优点,非常适合可离子化物质的分析。电容耦合非接触电导检测（C~4D）是一种基于目标分析物与背景电解质之间的电导率差异实现分析物检测的通用型电化学检测技术,理论上来说对所有带电物质均有响应。C~4D检测器结构简单,易与CE联用实现在柱无损检测,是毛细管电泳的理想检测器,如今毛细管电泳-电容耦合非接触电导检测（CE-C~4D）已广泛应用于食品、药物、环境和生化分析等多种领域。本论文基于实验室自主搭建的CE-C~4D系统,开展了以下三个生化分析方面的工作:以Good’s缓冲剂作为背景电解质,建立了人尿液中内源性γ-羟基丁酸（GHB）和加标饮料中外源性γ-羟基丁酸的分析方法;基于场放大进样（FASI）在线预富集技术发展了乙酰胆碱（ACh）的超灵敏分析方法,并将该方法应用于人脑脊液中ACh的检测;以超滤离心管作为乙酰胆碱酯酶（AChE）酶促反应的反应容器,通过CE-C~4D检测酶促反应的底物与产物,所发展的方法被用于AChE活性测定,酶促反应动力学研究和抑制剂筛选。全文共分为四章:第一章:首先简要介绍了毛细管电泳技术,包括其发展历史、分离模式、应用范围和检测技术等。然后从其检测技术出发,引出电容耦合非接触电导检测技术,详细介绍了其发展历史和检测原理。最后,对近年来CE-C~4D在食品、药物、环境和生化分析等领域的应用进行了较为全面的总结。第二章:本工作利用实验室自主搭建的CE-C~4D系统,引入Good’s缓冲剂作为CE分离和C~4D检测的背景电解质,发展了一种简单高效的CE-C~4D方法用于GHB的分析。通过理论探讨与实验优化,以150 mM 4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作为分离缓冲液,4 min内实现了GHB与其位置异构体α-羟基丁酸和β-羟基丁酸的分离,迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别小于1.1%和4.5%,显示出良好的精密度。GHB的C~4D信号与浓度在3-300μM范围内呈现良好的线性关系,R~2为0.9997,根据信噪比为3计算的检出限为0.37μM。在此基础上,对比研究了液-液萃取和固相萃取（SPE）样品处理技术用于样品基质净化的效果,以优化的SPE方法配合CE-C~4D分析,成功实现了加标饮料中外源性GHB以及人尿液中内源性GHB的准确测定。第三章:基于上述CE-C~4D系统,发展了常规的重力进样-CE-C~4D方法分析ACh与其结构类似物胆碱（Ch）。在此基础上,使用场放大进样在线预富集技术提高灵敏度,实现了ACh的超灵敏检测。通过系统优化电泳条件和FASI条件,以10 mM乙酸作为背景电解质,将样品配制于乙腈/水（90/10,v/v）中,在毛细管入口端注入一段水塞后,再于10 kV下电动进样8 s,在+20 kV的分离电压下110 s内即可实现ACh和Ch的快速分离。该方法线性和精密度良好,ACh的检出限低至0.058 nM,相比于常规的重力进样方法,实现了高达1054倍的富集。所开发的方法进一步与弱阳离子交换固相萃取样品处理技术相结合,已经应用于人脑脊液中痕量ACh的检测。第四章:以超滤离心管作为AChE酶促反应的反应容器,一定程度上兼具了游离酶与底物之间亲和力相对较高以及固定化酶可以重复利用的优势,并结合第三章所开发的重力进样-CE-C~4D方法直接分析了酶促反应溶液中AChE的天然底物ACh及其水解产物Ch。在最佳孵育条件下,利用该方法测定了AChE的活性,Ch的峰面积与AChE浓度在0.1-20 mU/mL的范围内呈现出良好的线性关系,检出限可达0.018 mU/mL。同时,还研究了AChE的酶促反应动力学,测得实验条件下AChE的8)为0.24 mM。此外,以他克林（Tac）和石山碱甲（Hup-A）为模型抑制剂评估了该方法应用于AChE抑制剂筛选的可行性,由抑制曲线得出Tac和Hup-A的半抑制浓度分别为0.035μM和0.40μM。上述结果证明了所开发的方法在酶分析领域的适用性,并有望进一步应用于人体液样品中AChE活性的测定和中药中AChE抑制剂的筛选。