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目的脂肪组织功能紊乱是NCDs发生发展的重要诱因。N-3PUFAs可调节和改善脂肪组织功能,但新近研究提示DHA和EPA的构成比可影响n-3PUFAs的调节效应。因此本研究以3T3-L1脂肪细胞为研究对象,观察不同DHA/EPA构成比在正常及炎症状态下对脂肪细胞糖脂代谢,脂肪细胞因子表达及分泌的影响,并探究二者构成比对脂肪细胞关键功能位点PPARγ及其相关信号通路的调节及影响,研究结果可为合理摄入膳食n-3PUFAs,防治NCDs提供新的理论依据。方法诱导3T3-L1前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,PA构建炎症模型。使用浓度为 100μmol/L,构成比为 3:1、1.5:1、1:1、1:1.5、1:3 的 DHA、EPA 混合物分别作用于正常和炎症状态的脂肪细胞24h，MTT法测定细胞活力度,葡萄糖氧化酶法测定糖消耗,油红O染色法鉴别成熟脂肪细胞并测定TG相对含量。Real time RT-PCR法测定脂联素、TNF-α、MCP-1及PPARγ mRNA相对表达水平,Western blot法测定胞内脂联素、MCP-1、PPARγ、CDK5蛋白表达及其磷酸化水平,ELISA法测定上清脂联素及MCP-1分泌水平,免疫共沉淀法测定PPARy蛋白磷酸化。结果正常状态下,与对照组相比,1.5:1和1:1组最能促进3T3-L1脂肪细胞糖消耗和TG合成,同时促进脂联素表达;.DHA和EPA构成比较高的3:1和1:3组均无此效应。与高DHA处理组(3:1和1.5:1)不同,高EPA构成比的DHA/EPA混合处理组(1:1.5和1:3)可显著提高脂肪细胞因子MCP-1表达与分泌水平。200μmol/LPA诱发脂肪细胞炎症反应,抑制脂联素表达与分泌,促进MCP-1表达与分泌,同时抑制细胞糖消耗及TG合成。炎症状态下,与PA处理相比,DHA含量较高的DHA/EPA混合处理组(3:1和1.5:1)可显著改善糖消耗与TG合成,此外,3:1还可显著改善脂联素表达,抑制MCP-1蛋白表达与分泌,高EPA处理组(1:1.5、1:3)则无此效应。正常状态下,1.5:1和1:1处理组最能促进PPARγ表达,DHA/EPA混合处理对PPARγ磷酸化水平,CDK5蛋白含量及其磷酸化水平则无显著影响。200μμmo1/L PA可显著抑制PPARγ表达,同时上调PPARγ及CDK5磷酸化水平。与PA处理组相比,各DHA/EPA混合处理组中,仅3:1和1.5:1组可上调PPARγ蛋白表达,而各组均不能减弱PPARy及CDK5的磷酸化水平。结论1.正常状态下,DHA/EPA构成比为1.5:1和1:1时更有利于改善脂肪细胞糖脂代谢,促进脂联素及PPARγ表达,高EPA构成比(1:1.5和1:3)的混合处理则无此效应。2.PA可导致脂肪细胞糖脂代谢紊乱,抑制脂联素的表达与分泌,促进MCP-1的表达与分泌;在PA诱导的炎症状态下,提高DHA/EPA混合处理中DHA的构成比可改善脂肪细胞功能紊乱。3.DHA/EPA构成比对PPARγ表达的调节差异,可能是导致不同DHA/EPA构成比调节脂肪细胞功能产生效应差异的重要原因。