【摘 要】
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豆科植物与根瘤菌之间形成的共生固氮系统是效率最高的生物固氮作用体系。百脉根中LjNlN(结瘤起始基因)是共生固氮过程中的一个关键基因,其在结瘤信号传导途径中发挥作用。同
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豆科植物与根瘤菌之间形成的共生固氮系统是效率最高的生物固氮作用体系。百脉根中LjNlN(结瘤起始基因)是共生固氮过程中的一个关键基因,其在结瘤信号传导途径中发挥作用。同源比对及结构预测表明LjNIP2可能是一个甲基转移酶,且LjNIP2与LjNIN的PB1结构域有相互作用。然而它是如何影响共生固氮过程的,还不清楚。本研究围绕LjNIP2基因展开,对其在共生固氮中的作用和功能进行相关研究。主要研究结果如下:1.对LjNIP2的LORE1插入突变体的研究中,F1代和F2代都没有得到纯合突变体,而杂合体并没有明显的共生表型。且F2代的杂合体与野生型比例接近2:1,很可能纯合致死。2.接种15d后,LjNIP2基因超表达植株与空载对照比,根部结瘤数量显著增加,在结瘤数量上存在显著性差异;接种3周后,LjNIP2阳性根的RNAi效率越高,阳性根结瘤数越少。以上结果说明,LjNIP2基因在共生固氮过程中起正调控作用。3.接种3周后,LjjNIP2RNAi植株阳性根结瘤数与空载比,有一定数量的下降,但不存在显著性差异;LjNIP2RNAi植株非阳性根平均结瘤数与空载比,数量相同,无显著性差异。这可能是因为每条阳性根的RNAi效率不同导致的。4.检测LjNIP2 RNAi植株的阳性根与空载的阳性根中LjNIW和LjNPL的表达量发现:随着LjNIP2的表达量降低,LjNIN和LjNPL的表达量均有所下调,且下调程度与LjNIP2的表达量有关。5.由于L_/NIP2的突变体得不到纯合体;LjNIP2超表达植株与空载比,花期提前,且花的数量和果荚数量都有所增加。LjNIP2基因很可能与百脉根的育性有关,且起正调控作用。6.以NIN的全长、PB1结构域、RWP-RK结构域为诱饵,分别筛选百脉根文库,未能获得新的相互作用蛋白。
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