ADMA，即非对称二甲基精氨酸简称，是内源性一氧化氮合酶的竞争性抑制剂，减少一氧化氮的生成，并诱发氧自由基生成，促进炎症反应，是影响血管内皮细胞功能障碍的重要因素。血浆中ADMA浓度升高与多种心血管发病风险因子相关，并参与调解这些风险因子对内皮血管的作用。大量证据表明ADMA是心血管疾病发生发展的标志物。许多前瞻性研究表明ADMA能独自显著的预示心血管疾病和死亡率的发生（早期的冠状动脉病变，ADMA升高19％时，就会导致急性动脉病变的产生，器官衰竭，ADMA升高42％时，就会致死）。ADMA与心血管疾病发生发展密切相关，可能是一个新的心血管疾病的标志物。国外对ADMA研究要早，且已经生产出ADMA检测试剂盒并应用于临床研究阶段。目前国内还没有研制出针对ADMA检测的试剂盒，只有少部分的工作者致力于ADMA与疾病发生的关系的研究并且只是停留于实验室阶段。鉴于此，为填补国内空白，本题欲采用ELISA或胶乳的方法研制出ADMA的检测试剂盒，应用于临床以提前预测疾病的发生，及早干预，减少病人的痛苦和医生工作者的压力，减少社会负担。目前，本题主要开展了以下研究:　　 本文首先设计合成并鉴定了两种ADMA半抗原:ADMA-CYS-ACA和nADMA-SMCC;采用活性酯法制备并鉴定了一种免疫原nADMA-SMCC-KLH;采用混合酸酐法制备并鉴定了两种包被原nADMA-SMCC-BSA和ADMA-CYS-ACA-BSA;其中以免疫原nADMA-SMCC-KLH和包被原ADMA-CYS-ACA-BSA的异源免疫分析组合效果最好。　　 将制备的免疫原免疫新西兰大白兔以制备抗ADMA多克隆抗体，共获得70ml免疫血清，并进行免疫特性分析，其抗体效价高达1∶512000，Westernblot检测表明抗体效价高、特异性强，实验获得了高效价的特异性的抗ADMA抗体，为进一步研究内皮功能障碍相关的多种心血管疾病的检测打下基础。　　 将制备的免疫原免疫BALB/C小鼠以制备抗ADMA单克隆抗体，共获得2株可稳定分泌抗ADMA单克隆抗体的杂交瘤细胞株，制备腹水并进行免疫特性分析，其抗体亚型为IgG2a1型，抗体亲和常数为1.18×108L/mol，该抗体与其相似物均无交叉反应，为进一步建立临床检验方法奠定了基础。　　 利用获得的单克隆抗体建立了ADMA直接竞争ELISA检测方法并初步形成了试剂盒。通过对ELISA影响各因素的优化，ADMA最低检测限为20μmol/L; ELISA试剂盒各项指标仍需进一步验证。