【摘 要】
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砷是一种常见的类金属剧毒元素,常用作除草剂和杀虫剂。对氨基苯砷酸是苯胺和砷酸反应合成的有机砷,毒性小于无机砷,常用于畜禽饲料添加剂。但是在禽畜饲料添加剂中,对氨基苯
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砷是一种常见的类金属剧毒元素,常用作除草剂和杀虫剂。对氨基苯砷酸是苯胺和砷酸反应合成的有机砷,毒性小于无机砷,常用于畜禽饲料添加剂。但是在禽畜饲料添加剂中,对氨基苯砷酸的不恰当使用,也会造成动物机体的慢性中毒。花青素是从植物成熟果实中提取的一种类黄酮化合物,具有抗氧化、清除自由基以及抗菌消炎等作用。为充分了解对氨基苯砷酸对DF-1细胞的毒性作用以及花青素在对氨基苯砷酸诱导DF-1细胞凋亡中的保护作用,本文首先通过建立DF-1细胞中毒模型,确定对氨基苯砷酸的染毒量,然后用氨基苯砷酸及花青素共孵育处理24h。检测相关指标的变化。通过检测细胞存活率确定对氨基苯砷酸攻毒剂量和花青素保护细胞的浓度,通过流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞内活性氧含量和线粒体膜电位变化来验证对氨基苯砷酸能引起细胞凋亡及花青素对细胞的保护作用;通过比色法检测丙二醛来验证细胞内氧化应激反应的变化;采用激光共聚焦技术观察细胞凋亡形态学变化。此外,免疫印迹技术分析凋亡关键因子caspase-3蛋白的表达。结果表明:10mM对氨基苯砷酸对细胞有明显的毒性作用可以诱导细胞凋亡。花青素浓度为50μg/m L和100μg/mL能显著的拮抗对氨基苯砷酸引起的细胞损伤、细胞凋亡率升高、细胞内活性氧和丙二醛的产生;花青素能抑制线粒体膜电位的下降、caspase-3的激活。总之,对氨基苯砷酸能诱导DF-1细胞凋亡,花青素可通过恢复线粒体膜膜电位、减少细胞内活性氧和丙二醛的产生等来拮抗阿散酸诱导的DF-1细胞凋亡。
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