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本研究用离体筛选突变体的技术获得鹰嘴紫云英抗甲硫氨酸变异系。对鹰嘴紫云英抗性系、半日花、霸王三种植物进行了原生质体分离和培养条件的研究。在此基础上开展了鹰嘴紫云英和半日花的科间体细胞杂交。取得的主要进展如下：
1.用鹰嘴紫云英(AstragaluscicerL.)的愈伤组织经NaN3诱变和筛选得到了抗100mmol/L甲硫氨酸变异细胞系，并分化成再生植株。该抗性系愈伤组织脱离选择压力6个月后，放在含100mmol/L甲硫氨酸的MS培养基上培养30天后，其相对增长率是对照的11.9倍。抗性系愈伤组织游离甲硫氨酸含量是对照的5.65倍，其它天冬氨酸族氨基酸含量也均比对照有大幅度增加。SDS-PAGE及同工酶分析表明：抗性系在可溶性蛋白质及过氧化物酶同工酶、细胞色素氧化酶同工酶酶谱上与对照有明显差异。
2.用所获鹰嘴紫云英甲硫氨酸抗性系的愈伤组织为材料，通过酶法分离出大量有活力的原生质体。原生质体经持续分裂形成了愈伤组织。比较了不同培养基、培养密度和激素组合对原生质体分裂和再生的影响。结果表明，原生质体以2×105/ml的植板密度，采用液体浅层培养在附加1.0mg/L2,4-D、0.2mg/L6BA、2％蔗糖、0.4mol/L甘露醇、500mg/L水解酪蛋白的DPD培养基中，培养后其细胞分裂频率可达到52.3％。原生质体再生的愈伤组织仍然保持对甲硫氨酸的抗性，同时对乙硫氨酸表现交叉抗性。
3.对半日花(HelianthemumSongaricumSchrenk)的愈伤组织分离的原生质体进行了培养，获得了愈伤组织。结果表明，用转代后生长10d的愈伤组织，经1％纤维素酶(CellulaseOnozukaR-10)、1％半纤维素酶(Hemicellulase，Sigma)和1.5％果胶酶(Pectinase，Serva)的酶组合溶液处理13h后，分离的原生质体产率为1.9×106个/g，原生质体活力在70％以上。促进原生质体分裂的最佳激素组合为3.0mg/LNAA和0.2mg/L6BA。
4.以霸王(Zygophyllumxanthoxylum)的愈伤组织和试管苗叶片为材料，对酶组合、植物激素组合和培养方法对其原生质体的分离和培养的影响进行了研究。结果表明：用2％纤维素酶、1％半纤维素酶和1％果胶酶的酶组合处理霸王愈伤组织13h可以高效分离出有活力的原生质体。液体浅层培养法最有利于原生质体的分裂和发育。原生质体以2.0×105/ml的植板培养密度培养于附加为1.0mg/L2,4-D、0.2mg/L6BA、0.2mg/LKT、2％蔗糖、0.5mol/L甘露醇和500mg/L水解酪蛋白的DPD培养基中培养，分裂频率可达到28.4％。
5.用PEG-高pH高钙法诱导原生质的融合，首次得到鹰嘴紫云英(+)半日花的科间体细胞杂种。通过碘乙酰胺(IOA)对鹰嘴紫云英抗性系原生质体进行预处理，并利用其抗性的遗传标志，建立了有广泛应用价值的杂种细胞筛选体系，获得了3块杂种愈伤组织。