龙葵(Solanum nigrum L.)为茄科茄属植物龙葵的干燥全草,有清热解毒、活血散瘀、利水消肿、止咳祛痰等功效。广泛用于治疗癌症、炎症、痢疾、感冒发热、牙痛、功能性子宫出血、毒蛇咬伤、疔疮、带状疱疹等多种疾病。本文主要进行了龙葵体外抗胃、肝癌活性部位筛选、活性部位化学成分分析、生物碱类单体成分体外抗胃、肝癌活性筛选及作用机制初探三个方面的研究,旨在通过体外药理研究和化学成分研究探讨龙葵体外抗肿瘤作用的物质基础。第一部分：龙葵体外抗胃、肝癌活性部位筛选。包括：1.本文选取体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721、人肝癌细胞HepG2.人胃癌细胞MGC-803为模型,以半数抑制浓度(IC50)为指标,采用MTT法考察了龙葵水提液和醇提液对上述肿瘤细胞生长的抑制作用。结果表明,龙葵水提液和醇提液对三种肿瘤细胞均有显著的增殖抑制作用,且呈明显的浓度—效应依赖关系。应用倒置显微镜观察龙葵水提液和醇提液对上述细胞形态的影响,结果表明,龙葵水提液和醇提液可显著改变三种癌细胞的细胞形态。2.采用经典的植物化学分离路线,将龙葵的醇提物分成了五个萃取部位,分别是石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水溶性部位。采用MTT法、细胞形态观察法对各萃取部位进行了体外抗胃、肝癌活性筛选,结果表明,龙葵石油醚部位和正丁醇部位对SMMC-7721、HepG2、MGC-803细胞均有明显的增值抑制作用,呈剂量依赖关系,并且可使上述细胞的形态发生显著变化。3.采用酸溶碱沉法自龙葵正丁醇部位分离得到了两种生物碱类成分,采用大孔吸附树脂法和丙酮沉淀法自龙葵正丁醇部位分离得到了两种皂苷类成分,采用蒸馏水及碱溶液煎煮法、Sevag除蛋白法和双氧水脱色法分离纯化得到了龙葵水溶性多糖和碱溶性多糖。并采用MTT法、细胞形态观察法对上述成分进行了体外抗胃、肝癌活性筛选,结果表明,龙葵生物碱、皂苷类成分能显著抑制人肝癌SMMC-7721、HepG2细胞,人胃癌MGC-803细胞的增值,并明显改变上述三种细胞的细胞形态,是龙葵体外抗胃、肝癌的活性成分,而两种多糖类成分对这三种癌细胞基本无活性。第二部分：龙葵活性部位化学成分分析。包括：1.采用水蒸气蒸馏法自龙葵石油醚部位分离得到了挥发油成分,并采用GC-MS联用技术对其进行了化学成分分析,结果鉴定出了49个组分,占总出峰面积的97.32%,分析结果表明石油醚部位挥发油的成分主要为酯类、烷烃类、脂肪酸类和酮类。2.利用化学鉴定法对龙葵生物碱、皂苷类成分进行了定性分析,分别采用酸性染料法、香草醛-高氯酸比色法、苯酚-硫酸法对龙葵生物碱、皂苷、多糖类成分进行了含量测定。第三部分：龙葵生物碱类单体成分体外抗肿瘤活性筛选及作用机制初探。1.结合MTT法、细胞形态观察法对龙葵中的主要生物碱类单体成分澳洲茄碱、澳洲茄边碱、ε-龙葵碱进行了体外抗胃、肝癌活性筛选。MTT结果表明,澳洲茄边碱对人肝癌SMMC-7721、人胃癌MGC-803细胞有显著的细胞毒作用。倒置显微镜观察细胞形态发现澳洲茄边碱可使SMMC-7721、HepG2、MGC-803细胞发生多种形式的形态变化。2.采用流式细胞术研究了不同剂量的澳洲茄边碱对人肝癌细胞SMMC-7721细胞周期分布的影响,分析结果显示,澳洲茄边碱可使SMMC-7721细胞阻滞于G2/M期,且呈明显的浓度—效应依赖关系；当药物作用细胞浓度为15μg/mL时,可诱导SMMC-7721细胞凋亡。说明澳洲茄边碱可通过影响细胞周期分布和诱导细胞凋亡达到体外抗肿瘤作用。