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目的:建立胚胎大鼠海马神经元和皮层神经元体外培养技术,了解色素上皮源性因子(PEDF)对海马神经元的营养支持和促突起生长作用,以及对皮层神经元过氧化氢损伤的保护作用。
方法:1)建立胚胎大鼠海马神经元体外培养技术。采用免疫荧光染色显示神经元的形态,Neurolucida测量神经元突起长度,由此观察PEDF对海马神经元存活和突起生长的影响。2)建立胚胎大鼠皮层神经元体外培养技术,采用过氧化氢构建皮层神经元体外损伤模型,测量LDH释放值,以观察PEDF对皮层神经元损伤的保护作用。
结果:1)PEDF可提高海马神经元的存活率,并对存活细胞的活力和突起生长有明显促进作用。2)PEDF可以促进海马神经元的突起生长,并具有一定的剂量依赖性。低浓度(25ng/ml)PEDF相对有利于轴突生长,而高浓度(100ng/ml)PEDF相对有利于树突生长。3)PEDF可以保护皮层神经元免受低浓度(500μM)过氧化氢损伤,并具有剂量依赖效应。但对高浓度过氧化氢(2000μM)引起的神经元损伤没有保护作用。
结论: PEDF对海马神经元具有营养作用,可以提高神经元的存活率,促进神经元突起生长。调节PEDF的浓度可以调节海马神经元树突和轴突的生长。PEDF能使皮层神经元免受过氧化氢损伤,具有神经保护作用。