【摘 要】
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本文利用携带双元载体质粒pTOK233(含有GUS报告基因和卡那霉素抗性基因NPTⅡ)的根癌农杆菌菌株LBA4404，用子叶为外植体，以GUS基因瞬时表达效果为指标，建立优化了番茄高效转化体
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本文利用携带双元载体质粒pTOK233(含有GUS报告基因和卡那霉素抗性基因NPTⅡ)的根癌农杆菌菌株LBA4404，用子叶为外植体，以GUS基因瞬时表达效果为指标，建立优化了番茄高效转化体系。 外植体大小对愈伤组织的形成有显著影响，相对小的外植体利于愈伤的形成。光照培养比暗培养更利于愈伤组织的形成。当农杆菌侵染外植体浸泡时间为8-10分钟，菌液浓度OD600约为0.15，稀释液pH=5.0，乙酰丁香酮使用浓度为50μmol／L，以及共培养时间为两天时获得了最高的转化效率。 以建立的转化体系，将农杆菌LBA4404携带的CMV-RNA2基因导入番茄子叶，获得了抗黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)病的番茄转化植株。转化的番茄植株田间试验显示，转化植株抗100mg／L的卡那霉素。将对转化植株进行抗病毒病的检测。
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