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冬虫夏草是一种名贵中药材,由于其特殊生长条件,加之人们的过度采挖,造成冬虫夏草这一珍稀资源更加缺乏。本研究旨在得到一株高产多糖的冬虫夏草菌株来扩展这一珍贵资源。对采自西藏那曲地区高山草甸的新鲜冬虫夏草子实体进行分离,得到50株大小、形状、颜色各异的菌株,运用插片法观察菌丝体和孢子形态特点发现,CC-2、CC-3、CC-4、CC-5、CC-9、CC-10菌株的菌丝和孢子形态与虫草菌株结构相似。经分子生物学鉴定CC-2菌株与拟青霉(Simplicillium sp)的相似性为97.80%,CC-3与枝孢菌(Cladosporium sp)的相似性高达100%,CC-4菌株与麦角菌(Claviciptitaceae sp)的相似性为99.76%,CC-5菌株与黑粉菌(Uncultured ustilago)的相似性为99.83%,CC-9菌株与黑粉菌(Ustilaqinoidea virens)的相似性高达100%,CC-10菌株与轮枝菌属(Verticillium sp)的相似性为97.17%。选取菌落洁白、生长旺盛、菌丝健壮的分离菌株CC-3进行发酵培养基和发酵条件优化,单因素和正交试验结果显示,以蛋白胨为氮源,多糖含量为0.686 g/L,以麦芽糖为碳源,多糖含量最高为0.786 g/L。采用正交试验,最优无机盐配比为KH2PO40.1 g、Mg SO4 0.05 g、Zn SO4 0.05 g时,多糖含量可达1.550 g/L。最优发酵条件为发酵温度为30℃,接种量为10%,多糖含量最高,可达2.180 g/L。以CC-3菌株为试验材料,以多糖得率为指标,正交试验比较热水浸提法和超声波辅助热水浸提法提取虫草胞内多糖工艺研究,热水浸提法的最优条件为提取温度90℃,料液比1:30,时间60 min,提取次数4次,多糖得率为2.265%。超声波辅助热水浸提法提取多糖的最优条件为开停时间3:7,超声时间90 min,超声次数4次,多糖得率最高为6.619%。后者比前者多糖得率高2.9倍。以CC-3菌株为供试菌株,50只肉鸡为试验材料,随机分成3组,对照组、1%剂量添加组和2%剂量添加组。对其进行免疫器官指数、H.E免疫组织切片染色和肠道微生物菌群的研究。从试验结果看,7-14 d时试验组与对照组,胸腺生长缓慢,21d时生长迅速,28 d开始胸腺指数有所降低,胸腺开始退化。法氏囊35 d后开始退化,试验组与对照组差异显著(P<0.05),明显降低了胸腺和法氏囊的退化程度。脾脏一直在增加,试验组与对照组差异显著,试验组脾脏指数明显增加。HE切片可以看出,与对照组相比,试验组的脾脏和法氏囊均无明显变化,切片组织正常。对照组脾脏红、白髓界限不明显,周围淋巴鞘也不明显,添加虫草多糖的试验组与对照组相比,淋巴细胞较密,脾脏发育较对照组好。法氏囊切片看,对照组皮质较少,淋巴细胞较疏,添加虫草多糖的试验组与对照组相比,淋巴细胞较密,皮质较厚,试验组发育良好。肉鸡肠道大肠杆菌数显著降低,试验组与对照组差异显著(P<0.05)。肉鸡肠道乳酸杆菌数与对照组相比显著增加(P<0.05),随着多糖添加量的增加,乳酸杆菌数也增加。肉鸡肠道双歧杆菌数随虫草多糖加入量的增加,菌数也在增加,1%剂量添加组较试验组差异显著(P<0.05),2%剂量添加组较试验组差异极显著(P<0.01)。