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油菜(Brassica napus)是我国主要的油料作物,是食用油、蛋白质和工业原料的重要来源。杂草极大地影响了油菜的产量和品质,因此,培育抗除草剂油菜品种对油菜的生产具有十分重要的意义。苯达松和磺酰脲是两种不同的除草剂,在生产上被广泛用于清除稻田的阔叶杂草。细胞色素P450基因CYP81A6编码一种单加氧酶,能使水稻对苯达松和磺酰脲产生抗性。转入了CYP81A6基因的拟南芥和烟草也能获得对这两种除草剂的抗性。本研究以甘蓝型油菜品系甲572为受体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化水稻CYP81A6基因,获得了抗苯达松和苯磺隆的油菜株系,为油菜的转基因育种提供了种质资源。主要研究结果如下：(1)以油菜下胚轴为外植体的转化获得了135个bastar抗性植株,PCR检测结果表明其中的37株为阳性,阳性率为27.4%。(2)利用Southern杂交分析了阳性转基因植株,结果显示目的基因在油菜基因组中的拷贝数为1-4个,在6个植株中是单拷贝插入的。(3)以β-actin为内参的半定量RT-PCR结果表明CYP81A6基因在所有转基因株系中均能表达,且不同株系之间的表达量有差异。其中CYP81A6-1的表达量最低,株系CYP81A6-2的表达量最高。(4)待油菜长至4-5片真叶时,分别用不同浓度的苯达松和苯磺隆喷洒T1代植株,进行抗药性鉴定。结果显示非转基因植株用浓度0.24g/L苯达松或1.0μg/ml苯磺隆处理时全部死亡,而转基因植株用1.6g/L苯达松或5.0μg/ml苯磺隆处理时仍能正常生长。当用4.8g/L苯达松或10.0μg/ml苯磺隆处理时,所有的转基因植株和非转基因植株全部死亡。这些结果表明CYP81A6基因能使转基因油菜对苯达松和苯磺隆产生抗性,苯达松的的安全浓度范围为0.24-1.6g/L,苯磺隆的安全浓度范围为1.0-5.0μg/ml.