研究背景和研究目的重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)是消化系统的常见病，该病在发病过程中常以胰腺坏死、胰周积液且并发多器官功能衰竭为其主要特点。临床研究表明，大多数SAP患者在起病早期即可产生大量富含胰酶、促炎细胞因子等有害物质的胰腺炎相关性腹水。胰腺炎相关性腹水形成的主要原因有：(1)因胰管压力增高、胆汁返流、胰酶激活并释放入细胞间质等原因导致胰腺组织损伤、溶解，形成大量富含胰酶的组织液从胰腺渗出；(2)胰腺组织中浸润的中性粒细胞被激活产生大量促炎细胞因子使得无菌性炎症发生，引起血管内皮损伤导致毛细血管通透性增加。大量胰腺炎相关性腹水的形成可引起机体有效循环血量下降，造成机体多脏器供血不足，同时腹水中的有害成分不仅对浸泡在腹水中的腹腔内脏器引起直接损伤，也可以经腹膜吸收进入体循环对远隔器官产生损伤作用。可见，在SAP发病早期若能及时、有效地将胰腺炎相关性腹水引流至体外，可能对SAP患者的治疗有重要的作用。基于以上认识，本研究以Wistar大鼠作为实验对象，在建立SAP大鼠模型的基础上，将大鼠腹腔内胰腺炎相关性腹水引流至体外，观察经皮腹腔置管引流(percutaneous catheterdrainage,PCD)在SAP治疗中的作用及相关机制。实验方法本研究将60只Wistar大鼠按随机数字表法分为三组，每组20只，同时将每组大鼠在建模后6h和24h二个时相点分别处死，每时相点随机选取10只。动物分组及模型制备方法如下：(1)实验组：对大鼠行胆胰管逆行注射牛磺胆酸钠的方法建立重症急性胰腺炎模型，作为实验组；(2)治疗组：在SAP大鼠基础上加以腹腔置入导管引流，作为治疗组；(3)对照组：大鼠开腹后翻动胰腺数次后关腹，作为对照组。其后按各组大鼠指定的时相点观察或检测以下指标：(1)各组动物的一般情况和存活率；(2)胰腺湿重的改变；(3)肉眼及光镜下胰腺组织病理变化；(4)血清及腹水中淀粉酶、蛋白酶的改变；(5)血清及腹水中TNF-、IL-1β、IL-6、IL-10等炎症相关因子的含量；(6)胰腺组织细胞凋亡情况；(7)胰腺组织中Bcl-2及Bax蛋白的表达规律；(8)炎症相关因子COX-2和iNOS在胰腺组织中的表达量。实验结果1、建模后24h治疗组大鼠存活率为100%，而实验组大鼠的存活率则为60%，二组比较差异显著。2、建模后6h、24h行胰腺湿重称量发现，治疗组胰腺水肿程度与实验组相比均显著减轻。3、光镜下病理学观察发现，实验组大鼠建模后6h可见胰腺腺泡细胞、胰岛细胞有不同程度的充血、水肿，在细胞间质也可见充血、水肿的发生，同时伴有大量炎症细胞浸润；建模后24h见胰腺腺体大小不一，失去正常形态，部分扩张呈空泡状，同时出现凝固性坏死、核碎裂、核溶解等改变，而治疗组胰腺组织镜下病理改变较实验组有显著改善，表现为胰腺组织空泡形成、感染、水肿、坏死、出血等病理学评分均较实验组程度轻。4、实验组大鼠血清中TNF-、IL-1β、IL-6在造模后6h与对照组相比均有显著升高，24h仍维持在高水平；于建模后各时相点，治疗组大鼠血清中抗炎细胞因子IL-10水平与实验组相比均明显升高，而相同时相点的治疗组大鼠腹水中胰蛋白酶含量与实验组大鼠相比则均有显著下降。5、Western blot结果发现，建模后6h、24h治疗组大鼠胰腺组织COX-2和iNOS的表达均较实验组大鼠显著降低；TUNEL染色发现，建模后各时相点的治疗组大鼠胰腺组织细胞凋亡指数均较实验组大鼠明显升高；免疫组化染色发现，与实验组大鼠比较，治疗组大鼠在建模后各时相点其胰腺组织抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降，而促凋亡蛋白Bax表达则显著升高。结论1、通过经皮腹腔置管引流建立了一种稳定的重症急性胰腺炎腹腔积液引流的动物模型。2、在SAP发病早期，通过经皮置管将富含胰酶、促炎细胞因子等有害物质的腹水及时引流至体外显著降低了血清中促炎细胞因子的浓度，减轻了SAP机体系统性炎症反应程度，同时可抑制胰腺组织炎症反应，促进胰腺细胞凋亡，抑制胰腺细胞坏死，从而对损伤的胰腺组织自我修复具有积极的治疗作用。