滇白珠药材质量控制方法研究

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滇白珠为杜鹃花科(Ericaceae)白珠树属(Gaultheria Kalm ex L.)植物滇白珠Gaultherialeucocarpa var.yunna nensis(Franch.)T.Z.Hsu&R.C.Fang 的干燥全草或者根部,有祛风除湿、清热解毒、活血化瘀、顺气平喘的作用。滇白珠具有多个基源和药用部位,被少数民族用于风湿类疾病的治疗。这些同属品种因形态学特征十分相似而难以区分。目前滇白珠的研究很少,且主要集中于其药材提取物药理作用的研究和单一(类)成分的含量测定研究。滇白珠多基源品种研究、多个活性成分同时定量研究以及主要活性部位化学成分研究鲜有报道。因此,本论文研究了滇白珠多基源品种的化学分类方法,同时对其不同类型多个抗炎活性成分进行定量研究。另外确定了滇白珠抗炎活性部位并对其进行化学分离研究。本论文取得了以下研究成果:1文献综述本论文系统综述了国内外相关文献99篇,包括植物资源研究,含量测定研究,化学成分研究和药理作用研究四方面,旨在为滇白珠药材质量标准的制定提供参考。2滇白珠药材多基源的植物化学分类方法研究化学计量学方法能够从繁冗的数据中,简化数据结构,挖掘数据之间的内在联系,发现潜在规律。本研究以超高效液相色谱仪为依托,被测样品多,数据量大,引入化学计量学方法,根据多个被测活性成分的峰面积数据,对滇白珠多个易混淆品种进行了分类。方法学考察显示RSD均低于2%。分类结果与《中国植物志》中基本一致。该研究为形态学特征难以鉴别的样品的提供了参考。3滇白珠多基源抗炎活性成分含量测定研究滇白珠具有多种抗炎成分,本研究利用高效液相色谱,建立了该类成分的快速同时定量的含量测定方法。该方法精密,稳定,可靠。另外,用化学计量学方法对测定数据实施数据挖掘,发现滇白珠多基源品种之间存在显著性差异(P<0.05),不同药用部位之间的差异不显著(P>0.05),主流品种滇白珠为最佳品种(根据抗炎成分含量高低程度判断);总体上,枝中含有的对照品含量高于其他3个药用部位。结果表明色谱技术结合化学计量学方法用于含量测定及结果分析非常有效,这为其他药材化学成分定量研究提供了参考。4滇白珠的抗炎镇痛活性部位(ARF)的化学成分研究笔者对滇白珠的抗炎镇痛活性部位(ARF)进行了化学成分研究,共分离鉴定16个化合物,其中水杨酸甲酯糖苷类化合物4个Methyl salicylate 2-O-β-D-glucoside(1),Gaultherin(2),MSTG-A(3),MSTG-B(4);糖酯类化合物3个Ethyl β-D-xylobioside(5),Ethyl-O-β-D-xylopyranosyl(1-6)-O-β-D-glucopyranoside(6),Methyl-O-β-D-xylopyranosyl(1-6)-O-β-D-glucopyranoside(7);单萜苷类化合物2个Roseoside(8),Paeoniflorin(9),苯甲酸类化合物5个Vanillic acid(10),2,5-dihydroxybenzoic acid(11),3,4-dimethoxycinnamic acid(12),Ferulic acid(13),Chlorogenic acid(14);其他成分 2 个4-hydroxy-2,6-dimethoxyphenol-1-O-β-D-glucopyranoside(15)和 3-methoxyl-1H-pyrrole(16)。其中化合物7为首次从白珠树属里分离得到;化合物8,9,12,15是首次从杜鹃花科中分离得到,该结果丰富了杜鹃花科植物化学成分类型,对滇白珠物质基础的深入研究具有参考价值。5创新点本文首次采用化学计量学方法结合色谱技术,对滇白珠易混淆的7个品种进行了有效分类。本文首次运用化学计量学方法+色谱技术对滇白珠多个基源品种和不同药用部位中多种类型抗炎成分进行含量测定研究及结果分析。从化学成分角度解释了滇白珠在少数民族地区的用药习惯:滇白珠为主流品种,不同民族用不同的药用部位治疗风湿。国际同行专家认为该方法非常合理,有效,且具有新意。本文证明了滇白珠30%乙醇部位即抗炎镇痛活性部位(ARF)。滇白珠ARF部位中首次发现长寿花苷(8),芍药苷(9)等抗炎成分,不仅丰富了杜鹃花科化学成分类型,还解释了文献的研究结果“同等条件下,抗炎、镇痛作用:30%乙醇洗脱部位>水杨酸甲酯糖苷类”。
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