第一部分 新生豚鼠海马神经干细胞的培养及鉴定 目的 神经干细胞(NSC)的研究已逐渐成为国内、外基础及临床医学各专业的重要研究课题。NSC是一种成体干细胞,存在于胚胎和成年哺乳动物中枢神经系统的多个区域,属多能干细胞,在一定的微环境中具有自我更新和向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞分化的能力,且具有极强的可塑性,利用NSC进行细胞治疗或基因治疗有很好的临床应用前景。豚鼠在耳科学基础研究中具有独特的优势,并得到广大耳科学研究者的广泛应用,建立一种简便、可行的豚鼠NSC培养方法将为NSC在耳科学领域研究的深入开展提供细胞支持,但目前关于豚鼠NSC的培养方法介绍的并不多。本实验旨在建立一种较为简便、可靠的豚鼠NSC分离、培养方法,为耳科学领域NSC的进一步深入研究提供帮助。 材料与方法 分离新生豚鼠海马组织进行NSC的原代、传代培养及诱导分化培养,倒置显微镜下观察培养细胞的形态特征,传代培养的细胞行MTT检测,了解其增殖情况,培养的细胞行扫描电镜、Nestin免疫细胞化学及NSE、GFAP免疫荧光化学观察,以鉴定所培养的细胞为NSC。