共振光散射技术在原小檗碱类生物碱分析中的应用研究

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共振光散射(Resonance Light Scattering, RLS)技术是上世纪九十年代发展起来的新型光谱分析技术,因其操作简单、快速、灵敏度高而受到分析工作者的广泛关注。目前该技术已应用于生命科学、环境科学、材料科学及分析化学等多个领域的分析研究工作。本文利用RLS技术对小檗碱类药物的含量进行分析测定并对其RLS光谱进行了深入研究。主要研究内容如下:(1)在pH1.81Britton-Robinson (BR)缓冲介质中,盐酸小檗碱(Berberine Hydrochloride, BH)与全氟辛烷磺酸(Perfluorooctanesulfonate, PFOS)相互作用,在290nm处产生显著增强的RLS信号。其增强RLS信号强度与盐酸小檗碱浓度在0.044~7.8μg/mL范围内成线性关系,据此建立了盐酸小檗碱的RLS测定方法,检出限达4.4ng/mL。方法用于药片含量测定,RSD≤4.37%。(2)在pH0.91HCl-NaAc缓冲介质中,盐酸巴马汀(Palmatine Hydrochloride, PaH)与硅钨酸(Silicotungstic acid, STA)通过静电相互作用导致RLS信号显著增强,最大RLS波长为297nm,增强的RLS信号强度与PaH浓度在0.091~3.2μg/mL范围内呈线性关系,据此建立了PaH的RLS分析方法,检出限为9.1ng/mL。实验考查了pH、离子强度对体系的影响,研究了体系紫外吸收光谱及荧光光谱,讨论了共振光散射增强机理。该方法用于黄藤素片、黄藤素胶囊及血清样品中盐PaH含量测定,RSD≤4.2%。(3)聚A(poly(A))是一种单链腺嘌呤寡居核苷酸,能使13nm左右的金纳米粒子(AuNPs)在高盐浓度下保持分散状态。盐酸巴马汀(Palmatine Hydrochloride, PaH)与poly(A)有强亲和作用可降低poly(A)分散AuNPs的能力而使AuNPs发生聚集,体系RLS信号显著增强。增强的RLS信号与盐酸巴马汀浓度在0.023~2.5μg/mL范围内呈线性关系,据此建立检测盐酸巴马汀的RLS分析法,检出限为2.3ng/mL。研究了体系的吸收分析光谱及颜色变化,表征了扫描电子显微镜、暗场散射成像、动态光散射及圆二色光谱讨论了反应机理。该方法成功用于黄藤素片、黄藤素胶囊以及尿样中盐酸巴马汀含量的测定,RSD≤4.0%。
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