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目的：
检测木犀草素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡、自噬、迁移和侵袭活性的影响，同时检测木犀草素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231内原癌基因(C-myc)、生存蛋白(Survivin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA表达的影响，及对半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bax、钙粘附蛋白-E(E-cadherin)、染色体10上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)、轻链Ⅰ蛋白3-Ⅱ型(LC3-Ⅱ)等因子蛋白表达的影响，从而探讨木犀草素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生物学活动影响的潜在作用机制。
方法：
将乳腺癌细胞MDA-MB-231与不同浓度的木犀草素共培养，设置不同的浓度组，分别为0μmol/L(对照组)、10μmol/L(低剂量组)、20μmol/L(中剂量组)和40μmol/L(高剂量组)，24h、48h和72h后，MTT法检测木犀草素对细胞增殖活性的影响；共培养48h后，流式细胞仪检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡率，细胞划痕实验检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移活性，Transwell小室实验检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭活性，RT-PCR检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231c-myc、Survivin和VimentinmRNA表达，WesternBlot检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231caspase-3、Bcl-2、Bax、E-cadherin、PTEN、p-Akt、LC3-Ⅱ蛋白表达。
结果：
1.不同浓度木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养24h、48h和72h后，各组间细胞的增殖率随着药物浓度的增加而降低，各浓度组差异有统计学意义(F(24h)=9.034，P=0.011；F(48h)=4.082，P=0.005；F(72 h)=6.661，P=0.000)，提示木犀草素能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖活性，且随着药物浓度的增加，抑制作用也随之增加。
2.不同浓度木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞凋亡率分别为(9.21±0.94)%、(15.62±1.05)%、(28.54±2.35)%和(37.97±2.54)%，总体比较差异有统计学意义(F=10.942，P=0.000)。以上实验结果提示木犀草素能促进乳腺癌细胞MDA-MB-231的凋亡，这种促进作用随着药物浓度的增加而增加。
3.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，在相同面积内，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组穿过小室基底膜的细胞数量分别为(214.31±10.45)个、(176.88±9.61)个、(115.05±10.34)个、(53.27±8.34)个，总体比较差异有统计学意义(F=11.646，P=0.000)，以上实验结果提示木犀草素能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的侵袭，这种抑制作用随着药物浓度的增加而增加。
4.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞迁移率分别为(84.31±6.14)%、(68.33±5.21)%、(45.95±4.65)%和(11.00±3.22)%，总体比较差异有统计学意义(F=15.349，P=0.000)。以上实验结果提示木犀草素能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移，这种抑制作用随着药物浓度的增加而增加。
5.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞中自噬泡所占百分比分别为(10.25±2.03)%、(44.12±3.11)%、(72.18±4.00)%和(94.69±4.35)%，总体比较差异有统计学意义(F=9.541，P=0.000)。以上实验结果证实，木犀草素能刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231的自噬，这种刺激作用随着药物浓度的增加而增加。
6.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞caspase-3蛋白相对表达量分别为(0.54±0.09)、(0.92±0.08)、(1.14±0.15)和(1.28±0.12)，组间整体差异有统计学意义(F=9.641，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞Bax蛋白相对表达量分别为(0.26±0.03)、(0.49±0.09)、(0.89±0.11)和(1.15±0.15)，组间整体差异有统计学意义(F=11.005，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞Bcl-2蛋白相对表达量分别为(1.19±0.12)、(0.92±0.09)、(0.61±0.08)和(0.31±0.05)，组间整体差异有统计学意义(F=6.972，P<0.001)。以上实验结果提示，木犀草素能呈剂量依赖性地刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231中caspase-3、Bax表达，从而抑制Bcl-2的表达。
7.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞c-mycmRNA相对表达量分别为(1.03±0.11)、(0.92±0.08)、(0.68±0.06)和(0.31±0.05)，组间整体差异有统计学意义(F=5.047，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞survivinmRNA相对表达量分别为(0.98±0.08)、(0.88±0.03)、(0.67±0.09)和(0.43±0.04)，组间整体差异有统计学意义(F=7.315，P<0.001)。以上实验结果提示，木犀草素可以呈剂量依赖性的抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231c-myc、survivinmRNA的表达。
8.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞vimentinmRNA相对表达量分别为(0.96±0.09)、(0.87±0.07)、(0.61±0.05)和(0.33±0.03)，组间整体差异有统计学意义(F=3.842，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞E-cadherin蛋白相对表达量分别为(0.21±0.03)、(0.39±0.05)、(0.79±0.05)和(1.25±0.13)，组间整体差异有统计学意义(F=9.645，P<0.001)；以上实验结果提示，木犀草素能刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231上皮细胞标志物E-cadherin表达，而抑制间质细胞标志物vimentin的表达。
9.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞LC3-Ⅱ蛋白相对表达量分别为(0.30±0.05)、(0.46±0.09)、(0.84±0.05)和(1.31±0.09)，组间整体差异有统计学意义(F=10.347，P<0.001)。以上实验结果说明木犀草素能刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达。
10.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞p-Akt蛋白相对表达量分别为(1.05±0.15)、(0.91±0.11)、(0.49±0.09)和(0.26±0.03)，组间整体差异有统计学意义(F=11.005，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞p-mTOR蛋白相对表达量分别为(1.19±0.12)、(0.92±0.09)、(0.61±0.08)和(0.31±0.05)，组间整体差异有统计学意义(F=6.972，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞PTEN蛋白相对表达量分别为(0.15±0.02)、(0.43±0.05)、(0.79±0.08)和(0.98±0.11)，组间整体差异有统计学意义(F=8.662，P<0.001)。以上结果提示，木犀草素能呈剂量依赖性地抑制PTEN/PI3K/Akt信号通路活性。
结论：
木犀草素能显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖、迁移和侵袭，并诱导其凋亡和自噬。该作用可能是通过抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231内PTEN/PI3K/Akt信号通路活性，调节该通路相关的因子表达而引起的。
检测木犀草素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡、自噬、迁移和侵袭活性的影响，同时检测木犀草素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231内原癌基因(C-myc)、生存蛋白(Survivin)、波形蛋白(Vimentin)mRNA表达的影响，及对半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bax、钙粘附蛋白-E(E-cadherin)、染色体10上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)、轻链Ⅰ蛋白3-Ⅱ型(LC3-Ⅱ)等因子蛋白表达的影响，从而探讨木犀草素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生物学活动影响的潜在作用机制。
方法：
将乳腺癌细胞MDA-MB-231与不同浓度的木犀草素共培养，设置不同的浓度组，分别为0μmol/L(对照组)、10μmol/L(低剂量组)、20μmol/L(中剂量组)和40μmol/L(高剂量组)，24h、48h和72h后，MTT法检测木犀草素对细胞增殖活性的影响；共培养48h后，流式细胞仪检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡率，细胞划痕实验检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移活性，Transwell小室实验检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭活性，RT-PCR检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231c-myc、Survivin和VimentinmRNA表达，WesternBlot检测不同浓度木犀草素组乳腺癌细胞MDA-MB-231caspase-3、Bcl-2、Bax、E-cadherin、PTEN、p-Akt、LC3-Ⅱ蛋白表达。
结果：
1.不同浓度木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养24h、48h和72h后，各组间细胞的增殖率随着药物浓度的增加而降低，各浓度组差异有统计学意义(F(24h)=9.034，P=0.011；F(48h)=4.082，P=0.005；F(72 h)=6.661，P=0.000)，提示木犀草素能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖活性，且随着药物浓度的增加，抑制作用也随之增加。
2.不同浓度木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞凋亡率分别为(9.21±0.94)%、(15.62±1.05)%、(28.54±2.35)%和(37.97±2.54)%，总体比较差异有统计学意义(F=10.942，P=0.000)。以上实验结果提示木犀草素能促进乳腺癌细胞MDA-MB-231的凋亡，这种促进作用随着药物浓度的增加而增加。
3.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，在相同面积内，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组穿过小室基底膜的细胞数量分别为(214.31±10.45)个、(176.88±9.61)个、(115.05±10.34)个、(53.27±8.34)个，总体比较差异有统计学意义(F=11.646，P=0.000)，以上实验结果提示木犀草素能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的侵袭，这种抑制作用随着药物浓度的增加而增加。
4.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞迁移率分别为(84.31±6.14)%、(68.33±5.21)%、(45.95±4.65)%和(11.00±3.22)%，总体比较差异有统计学意义(F=15.349，P=0.000)。以上实验结果提示木犀草素能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移，这种抑制作用随着药物浓度的增加而增加。
5.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞中自噬泡所占百分比分别为(10.25±2.03)%、(44.12±3.11)%、(72.18±4.00)%和(94.69±4.35)%，总体比较差异有统计学意义(F=9.541，P=0.000)。以上实验结果证实，木犀草素能刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231的自噬，这种刺激作用随着药物浓度的增加而增加。
6.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞caspase-3蛋白相对表达量分别为(0.54±0.09)、(0.92±0.08)、(1.14±0.15)和(1.28±0.12)，组间整体差异有统计学意义(F=9.641，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞Bax蛋白相对表达量分别为(0.26±0.03)、(0.49±0.09)、(0.89±0.11)和(1.15±0.15)，组间整体差异有统计学意义(F=11.005，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞Bcl-2蛋白相对表达量分别为(1.19±0.12)、(0.92±0.09)、(0.61±0.08)和(0.31±0.05)，组间整体差异有统计学意义(F=6.972，P<0.001)。以上实验结果提示，木犀草素能呈剂量依赖性地刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231中caspase-3、Bax表达，从而抑制Bcl-2的表达。
7.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞c-mycmRNA相对表达量分别为(1.03±0.11)、(0.92±0.08)、(0.68±0.06)和(0.31±0.05)，组间整体差异有统计学意义(F=5.047，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞survivinmRNA相对表达量分别为(0.98±0.08)、(0.88±0.03)、(0.67±0.09)和(0.43±0.04)，组间整体差异有统计学意义(F=7.315，P<0.001)。以上实验结果提示，木犀草素可以呈剂量依赖性的抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231c-myc、survivinmRNA的表达。
8.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞vimentinmRNA相对表达量分别为(0.96±0.09)、(0.87±0.07)、(0.61±0.05)和(0.33±0.03)，组间整体差异有统计学意义(F=3.842，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞E-cadherin蛋白相对表达量分别为(0.21±0.03)、(0.39±0.05)、(0.79±0.05)和(1.25±0.13)，组间整体差异有统计学意义(F=9.645，P<0.001)；以上实验结果提示，木犀草素能刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231上皮细胞标志物E-cadherin表达，而抑制间质细胞标志物vimentin的表达。
9.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞LC3-Ⅱ蛋白相对表达量分别为(0.30±0.05)、(0.46±0.09)、(0.84±0.05)和(1.31±0.09)，组间整体差异有统计学意义(F=10.347，P<0.001)。以上实验结果说明木犀草素能刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达。
10.不同浓度的木犀草素与乳腺癌细胞MDA-MB-231共培养48h后，对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞p-Akt蛋白相对表达量分别为(1.05±0.15)、(0.91±0.11)、(0.49±0.09)和(0.26±0.03)，组间整体差异有统计学意义(F=11.005，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞p-mTOR蛋白相对表达量分别为(1.19±0.12)、(0.92±0.09)、(0.61±0.08)和(0.31±0.05)，组间整体差异有统计学意义(F=6.972，P<0.001)；对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞PTEN蛋白相对表达量分别为(0.15±0.02)、(0.43±0.05)、(0.79±0.08)和(0.98±0.11)，组间整体差异有统计学意义(F=8.662，P<0.001)。以上结果提示，木犀草素能呈剂量依赖性地抑制PTEN/PI3K/Akt信号通路活性。
结论：
木犀草素能显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖、迁移和侵袭，并诱导其凋亡和自噬。该作用可能是通过抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231内PTEN/PI3K/Akt信号通路活性，调节该通路相关的因子表达而引起的。