妊娠期母体高糖饮食对子代体液调控和心血管功能的影响

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第一部分妊娠期母体高糖饮食对子代体液调控的影响目的:研究妊娠期母体高糖饮食对子代体液调控的影响及其“印迹”效应。方法:实验分为妊娠期母体高糖饮食组(高糖组,HS)及妊娠期母体正常饮食组(对照组,C)的成年雄性子代大鼠,分别对成年子代的行为学、功能学进行检测,1)称量子代大鼠体重、心脏和肾脏重量;2)在基础状态下,用血气分析仪检测成年子代大鼠血气指标和电解质水平,用渗透压仪检测血浆渗透压;3)在脱水应激下,检测成年子代大鼠饮水饮盐行为;4)成年子代大鼠侧脑室注入血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)检测妊娠期母体高糖对子代饮水饮盐行为的影响;5)Westernblot方法检测肾脏中血管紧张素Ⅱ1型受体(AngiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)和2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)的蛋白水平;6)光镜观察肾脏结构。结果:高糖组成年子代大鼠的体重、心脏及肾脏的重量、血气指标及电解质水平与对照组比较无明显差异。高糖组子代的侧脑室给予AngⅡ后,监测给药后2h的饮水及饮盐水量均较对照组增加。脱水24h后,高糖组2h饮水饮盐量与对照组有明显差异。高糖组肾脏AT2R蛋白表达增高,AT1R蛋白表达与对照组比较无显著性差异。HE染色光镜观察高糖组肾脏肾小球系膜细胞增多,基底膜增厚,与对照组比较差异显著。结论:妊娠期母体高糖饮食可影响成年子代大鼠的饮水、饮盐的行为反应使其体液平衡失调,也可影响肾脏ATR蛋白表达及肾脏的组织结构,并对成年子代体液调控系统产生一定的“印迹”效应。第二部分妊娠期母体高糖饮食对子代心血管功能的影响目的:研究妊娠期母体高糖饮食对成年子代心血管功能的影响。方法:通过静脉给予AngⅡ、血管紧张素Ⅱ受体1型(AT1R)阻断剂(Losartan)、血管紧张素Ⅱ受体2型(AT2R)阻断剂(PD123319),分别记录妊娠期母体高糖饮食的成年子代(高糖组,HS)及妊娠期母体正常饮食的成年子代(对照组,C)的动脉血压,比较两组间差异,并观测两组子代大鼠胸主动脉和肠系膜动脉对AngⅡ的收缩反应及对乙酰胆碱(aeetylcholine,ACh)的舒张反应,观察Losartan或PD123319对AngⅡ收缩反应的影响等。用Fura2-AM处理的肠系膜血管环并检测AngⅡ引起的Ca2+浓度变化。用放射免疫法检测血液中AngⅠ和AngⅡ的浓度;用Western blot的方法检测成年子代心脏AT1R和AT2R的蛋白表达水平。光镜观测两组心肌组织结构的变化。结果:与对照组比较,高糖组子代心血管系统对AngⅡ、PD123319、Losartan的反应明显增强;且离体胸主动脉、肠系膜动脉对AngⅡ收缩反应增强,对ACh的舒张反应减弱。高糖组肠系膜动脉对AngⅡ引起的游离Ca2+浓度比值(Ratio)与对照组比较有统计学差异;高糖组子代血浆AngⅠ浓度与对照组比较明显增加,而AngⅡ浓度与对照组比较减少,均有显著性差异。高糖组子代大鼠心脏中AT2R的蛋白表达水平明显降低,而AT1R的蛋白表达水平与对照组比较无统计学差异。光镜下组织学观察:高糖组成年子代大鼠的心肌纤维变细、心肌细胞呈萎缩性改变。结论:妊娠期母体高糖饮食可通过调节血管舒张功能、心脏AngⅡ受体蛋白表达的改变等影响子代的心血管功能,即产生“印迹”效应,以此增加成年子代对高血压等心血管疾病发生的易感性。
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