壳聚糖/改性纳米羟基磷灰石复合水凝胶的制备及其软骨缺损修复有效性评价

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软骨修复是临床面临的一大难题,目前常用的治疗方法其效果均不理想,在目前的人工关节软骨修复材料中,水凝胶材料由于具有良好的生物相容性,与ECM相似的3D微环境,合适的孔隙结构,且能够提供短期的机械稳定性以及增加细胞附着表面积,附着力等特点,成为目前较为理想的关节软骨修复材料。而壳聚糖(CS)/纳米羟基磷灰石(HA)复合水凝胶因具有良好的生物活性、可吸收性、可降解性,在生物医学和组织工程领域得到了广泛的应用。为了进一步提高HA纳米粒子与壳聚糖之间的相容性,本文通过在羟基磷灰石表面接枝CS对HA表面进行改性,获得HA-g-CS,然后将其与壳聚糖共混制备CS/HA-g-CS复合水凝胶。FTIR、TGA、XRD测试结果表明,CS成功接枝到了HA的表面,最大接枝率为15.8%;SEM结果表明,HA-g-CS在CS基体的分散性相对于HA明显得到改善,且CS/HA-g-CS比CS/HA复合水凝胶的抗压强度提高了78.2%。CS/HA-g-CS复合水凝胶生物相容性评价结果表明,材料的细胞毒性、全身急性毒性、全身亚急性毒性、致敏性、植入安全性均达到了国家标准要求,表明CS/HA-g-CS复合水凝胶可应用于组织工程材料。将CS/HA-g-CS复合水凝胶植入到大鼠关节软骨缺损处,术后4周和12周进行取材,结果表明,CS/HA-g-CS复合水凝胶和CS/HA复合水凝胶均能够促进软骨缺损的修复,CS/HA-g-CS复合水凝胶的修复效果明显优于CS/HA复合水凝胶;CS/HA-g-CS复合凝胶在术后12周能够使关节软骨缺损部位达到理想的修复效果,且修复后组织的厚度及颜色均与周围组织相一致。软骨生成标记物Col-II mRNA、BMP-2 mRNA和GAG mRNA的表达水平随修复周期的延长而提高。上述研究结果表明,CS/HA-g-CS复合水凝胶具有较强的软骨缺损修复能力,将来作为新型关节软骨修复产品具有潜在的临床应用价值。
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