胶原蛋白多肽—铬螯合物降血糖、抗热应激保健功效的研究

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胶原蛋白是猪皮中含量较高,活性较为重要的一种蛋白质。本试验以猪皮为原料,选择最佳工艺水解猪皮中的胶原蛋白为小肽,与无机铬CrCl3.6H2O螯合为易于吸收的有机铬形式,并选择昆明种小白鼠作动物试验,研究其降血糖、降血脂及抗应激的保健功能。 以猪皮为原料,采用盐酸水解法提取胶原蛋白,确定最佳提取条件。结果表明,用2M的盐酸,85℃,保持PH值为2,3小时条件下,水解产物符合要求,且已经分解为小肽。然后与CrCl3.6H2O以适当比例螯合。 实验动物采用昆明种小鼠,糖尿病模型用化学试剂四氧嘧啶按照200mg/kg剂量腹腔注射,正常鼠以同样剂量注射生理盐水,空腹血糖超过11.1mmol/L的小鼠为糖尿病模型。实验小鼠分为4组:正常组,正常喂铬组,模型组,模型喂铬组。造模组以饮水方式按照1ug/d只的剂量喂以Cr3+,每周处死一批,试剂盒测定血液指标。饲养6周后,正常鼠喂铬不会使血糖浓度和血脂指标发生显著变化(P>0.05);模型喂铬组的血糖浓度和甘油三酯含量与模型组相比,下降显著(P<0.05);各组小鼠随机取肝脏匀浆,用生理盐水提取可溶性蛋白乙醇沉淀后以样品缓冲液溶解,采用聚丙烯凝胶电泳分离,各组的蛋白带没有区别。 取70只正常小鼠分为两组,其中一组喂铬,方法同上,另一组作为对照,每隔一天处死一批,血液测定法同上。饲养12天后,喂铬组最终的血液指标与正常组比较没有差异,刚喂铬后几天差异明显。同样作肝脏蛋白电泳,差别明显。 热应激实验:另取24只小鼠,雌雄各半,分为四组,雌雄各有一组喂以铬,剂量同上,四周后将这些小鼠置于43℃,相对湿度30%的烘箱中,记录各小鼠的死亡时间,1小时死亡率。耐热时间雌鼠比雄鼠略长,但没有统计学意义,喂铬后雌鼠耐热时间显著增长(P<0.05),雄鼠相差不显著(P>0.05)。取肝、肾、心、腿提取蛋白电泳,各组蛋白没有差异。
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