持续埋植褪黑素对绒山羊绒毛生长特性和相关基因影响的研究

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绒山羊绒毛品质决定于绒的细度和长度,褪黑素对绒毛的周期性生长有促进作用,了解褪黑素对绒毛品质的影响及其褪黑素促进绒毛生长的机理为在生产实践应用奠定理论基础。本试验选取60只内蒙古白绒母山羊作为研究对象,分为埋植组和对照组。每月测定受试羊绒和毛细度、长度及绒毛质量比,研究褪黑素对绒毛生长特性与绒毛品质的影响;同时应用荧光定量PCR技术研究与绒毛生长相关基因一年中的表达情况,进而分析绒毛生长相关基因与埋植褪黑素的关系,结果如下:1.在自然光照及放牧条件下,绒山羊周岁母羊夜间血浆中褪黑素含量平均为17.34pg/mL,埋植褪黑素后,血浆中褪黑素含量增加到180.61 pg/mL,增加了9.42倍。埋植组与对照组差异极显著。2.在自然光照条件下,绒山羊周岁母羊一年中血浆中催乳素的含量较低,平均为1.60ng/mL,埋植褪黑素后,抑制了夜间血浆中催乳素的分泌。3.持续埋植褪黑素有增加粗毛长度的趋势,对羔羊粗毛有变细的趋势,在新的粗毛生长的同时伴随着旧毛的脱落;持续埋植褪黑素对已经进入兴盛期的羊绒长度没有影响,但可提早2个月诱发二次生绒,羊绒提前长出体表3-4cm,对羊绒有变细的趋势;持续埋植褪黑素平均可增加产绒量66.08g,对产羔数也有增加的趋势。4. RORα、RORβ、RORγ三个基因在绒山羊皮肤中均有表达,但对绒毛生长发挥作用的时期不同, RORα可能比RORβ和RORγ更重要。埋植褪黑素促进了褪黑素与ROR核受体在绒毛生长兴盛期的结合。5.埋植褪黑素后,降低了BMP2和TGF-β在兴盛期的表达量,但对BMPRIB和TGF-βRⅡ的表达量影响较小,说明褪黑素对绒山羊绒毛生长发挥作用时可能BMP2和TGF-β参与了该过程,但不是通过BMPRIB和TGF-βRⅡ发挥作用,TGF-β信号通路在绒毛生长中起负性调节作用。6.持续埋植褪黑素促进了Wnt10b和Frizzled的表达,也促进了Wnt10b和Frizzled在兴盛期的结合。7.埋植褪黑素可促进PDGFA及其受体的表达量,同时促进它们的结合,也可明显增加FGF5在兴盛期的表达量。在绒山羊绒毛周期性生长过程中, PDGFA、PDGFRA和NTRK3协同作用。在兴盛期,PDGF信号通路发挥重要作用。8. delta1、Notch1和hairless在绒山羊绒毛周期性生长过程中协同作用,且在兴盛期发挥的作用较为重要,埋植褪黑素后,降低了兴盛期Notch信号通路分子中delta1、Notch1和hairless的表达量。9.与血浆中褪黑素含量显著相关(P<0.05)的基因有TGF-βRⅡ、FGF5、MSX-2、Wnt10b、Frizzled、PDGFRA、RORα、RORβ,其中正相关的有:FGF5、RORα、RORβ,其余为负相关。除RORα外,RORβ也可能是褪黑素结合的核受体基因。10.褪黑素在绒毛周期性生长中可能通过与RORα、RORβ结合,进而引起β-catenin、PDGFA表达量的变化,通过这些信号分子使下游分子转录的,同时带动了其它信号通路相互作用而发挥生物学作用。11.基因与绒毛性状相关分析表明,与毛长显著相关(P<0.05)的基因有:TGF-β2、FGF5、MSX-2、delta1、Notch1、Frizzled和PDGFRA;与毛细显著相关(P<0.05)的基因:TGF-β2、delta1、β-catenin、RORα;TGF-βRⅡ、delta1、hairless与绒长的等级相关显著(P<0.05),Frizzled与绒细的等级相关极显著(P<0.01),而FGF5、MSX-2与绒毛比的等级相关显著(P<0.05)。delta1、Notch1、hairless与绒毛比增长量正相关(P<0.05),其余各增长量与本试验中研究的基因相关性较小。
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