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目的在膀胱癌全基因组关联研究(Genome-wide association studies,GWAS)基础上,通过病例‐对照研究,在中国北方汉族人群中验证单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)rs9642880、rs798766与膀胱癌发病风险关系,以及探索其与膀胱癌病理分级、分期相关性。材料和方法从天津医科大学第二医院泌尿外科招募363例膀胱癌患者,均为汉族人,且均经病理检查证实为尿路上皮膀胱癌。另外选取同时期来天津医科大学第二医院体检经确认未罹患肿瘤、年龄、性别与病例组相匹配的384名健康志愿者作为对照组。抽取其5ml静脉血液用于全基因组DNA提取。采用等位基因特异性PCR技术(Allele-specific PCR,AS-PCR)对病例组和对照人群基因型进行分型。分别选取10%膀胱癌患者及对照组人群,用直接测序方法来验证AS-PCR基因分型结果的准确性。统计分析在对照组人群中利用χ~2检验检测rs9642880、rs798766基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡。双侧χ~2检验(分类变量)或T检验(连续变量)比较病例组与对照组一般人口学变量、吸烟危险因素、等位基因频率以及基因型频率分布。应用非条件多因素Logistic回归分析估计相对危险度(odds ratios,OR)及95%可信区间(confidence intervals,CI)。用Q检验统计学方法检测分层亚组ORs之间的异质性(低级别vs高级别;NMIUBC vs MIUBC)。P<0.05为差异有统计学意义。数据统计用计算机统计分析软件(SAS 9.1.3)进行处理。结果1.病例组和对照组临床基本资料特点通过对病例组和对照组临床资料的对比分析,病例组和对照组性别、年龄构成无显著统计学差异(P>0.05)。实验组曾吸烟人数、现吸烟人数比例明显高于对照组,而非吸烟人数比例明显低于对照组(P<0.001),表明吸烟为膀胱癌的危险因素。对照组rs9642880、rs798766基因型频率均与Hardy-Weinberg平衡相符合(P>0.05),表明对照组群体代表性良好。2.单核苷酸多态性rs9642880与膀胱癌发病风险关系Rs9642880 T等位基因频率在病例组和对照组中存在明显差异(经性别、年龄、吸烟史校正后OR=1.30,95%CI=1.04-1.62,P=0.022);与基因型GG相比较,基因型GC+CC明显增加膀胱癌的发病风险(经性别、年龄、吸烟史校正后OR=1.42,95%CI=1.07-1.89,P=0.016)。3.单核苷酸多态性rs9642880与膀胱癌病理分级、分期的关系根据膀胱癌病理分级、分期进行分层分析,从多因素非条件Logistic回归分析数据来看,与基因型GG相比较,似乎rs9642880 GT+TT基因型明显增加了高级别、肌层浸润型膀胱癌(Muscle Invasive Bladder Cancer,MIBC)发病风险(经性别、年龄和吸烟状况校正后OR=1.49,95%CI=1.07-2.08,P=0.017;OR=1.65,95%CI=1.03-2.64,P=0.036),而与高级别、肌层浸润型膀胱癌(Non-muscle Invasive Bladder Cancer,NMIBC)发病风险无关(经性别、年龄和吸烟状况校正后OR=1.32,95%CI=0.89-1.95,P=0.167;OR=1.36,95%CI=0.99-1.85,P=0.055),然而对各亚组ORs间的异质性进行检测,结果显示各亚组间无明显统计学差异(低级别vs高级别,P=0.644;NMIBC vs MIBC,P=0.421),表明单核苷酸多态性rs9642880与膀胱癌病理分级、分期无相关性。4.单核苷酸多态性rs798766与膀胱癌发病风险关系病例组rs798766 T等位基因频率分布与对照组T等位基因频率分布存在显著差异性(经性别、年龄、吸烟史校正后OR=1.53,95%CI=1.13-2.08,P=0.006);T等位基因明显增加了膀胱癌发病风险(经性别、年龄、吸烟史校正后校正OR,1.61;95%CI,1.14-2.25)。5.单核苷酸多态性rs798766与膀胱癌病理分级、分期的关系与rs9642880类似,从多因素非条件Logistic回归分析数据来看,似乎rs798766T等位基因(CT+TT基因型)明显增加了低级别、NMIBC发病风险(经性别、年龄和吸烟状况校正后OR=1.92,95%CI=1.24-2.97,P=0.004;OR=1.73,95%CI=1.21-2.48,P=0.003),而与高级别、MIBC发病风险无关(经性别、年龄和吸烟状况校正后OR=1.44,95%CI=0.98-2.13,P=0.066;OR=1.25,95%CI=0.72-2.17,P=0.424),各亚组ORs间的异质性进行检测结果显示亚组间无明显统计学差异(低级别vs高级别,P=0.335;NMIBC vs MIBC,P=0.333),表明单核苷酸多态性rs798766与膀胱癌病理分级、分期无相关性。结论1.采用等位基因特异性PCR技术对单核苷酸多态性位点进行基因分型是一种准确、高效的方法,成本低廉,设备需求简单,为中小型实验室进行SNP与复杂疾病发病风险的研究提供了重要的技术支持。2.Rs9642880 T等位基因和rs798766 T等位基因明显增加了中国汉族人群尿路上皮膀胱癌发病风险,可能是未来预测中国汉族人群尿路上皮膀胱癌发病风险的两个较好基因标志物。3.单核苷酸多态性rs9642880和rs798766与中国汉族人群尿路上皮膀胱癌病理分级、分期无相关性。