目的： 建立检测比格犬血浆中AF-2364的液相色谱-质谱联用分析方法；研究3AF-2364在比格犬体内的药代动力学；研究AF-2364对比格犬的抗生育作用。 方法： ①建立LC-MS检测方法：高效液相色谱仪为Agilent1200系列、质谱仪为德国Bruker公司Esquire HCT；血浆经正己烷：乙酸乙酯(1：4)萃取；色谱条件：柱温25℃，流速：0.3 mL·min-1，色谱柱：Zorbax SB-C18(2.1 mm×150 mm，5μm)，流动相：乙腈-0.1％甲酸为55：45(V/V)，检测波长302nm。质谱条件：ESI(电喷雾离子源)，正离子检测，雾化气压力设为25 psi；干燥气(N2)流速设为7 L·min-1，干燥气温度设为350℃。多反应监测(multiple reaction monitoring，MRM)方式定量，AF-2364335.0→302.9，裂解振幅电压设为0.35 v，卡马西平，236.9→193.8，裂解振幅电压设为0.25 v。②6只雄性比格犬，分别给以AF-23645mg/kg静注，每周一次，连续6周；待静脉给药结束后的第10周，基本恢复正常，再灌胃给药给以5mg/kg1次。药动学实验：分别于第一次静脉给药和灌胃给药后于24h内多点取血，用LC-MS/MS法测定血浆中AF-2364的浓度。静脉给药和灌胃给药后血浆药物浓度的数据经DAS程序处理，用非房室模型估算药动学数据。以AUC0-t计算生物利用度。抗生育实验：分别于静脉给药后每隔两周取睾丸、附睾、血液；用光镜和电镜观察睾丸和附睾的形态学改变。同时观察血常规和肝肾功能变化 结果： ①AF-2364在0.01-5μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.99948)；最低检测限为0.01μg·mL-1，平均相对回收率(100.14±1.59)％；平均绝对回收率为(75.87±3.69)％；日内、日间精密度变异系数分别为(2.188±0.104)％和(1.948±0.553)％②静脉和灌胃给药后af-2364的Cmax分别为(4.582±0.23)mg·L-1和(0.101±0.01)mg·L-1，Tmax分别为0.083h和1.5h，t1/2z(2.43±0.139)h and(3.44±0.211)h，AUC(0-t)分别为(6.121±0.308)mg·h·L-1，(0.572±0.036)mg·h·L-1，AUC(0-∞)分别为(6.250±0.322)mg·h·L-1，(0.637±0.048)mg·h·L-1；AF-2364在比格犬体内的绝对生物利用度F=(10.198±0.59)％③睾丸病理学检查显示，静脉给药4周后部分的长形生精细胞从生精上皮脱落，曲细精管中可见一些脱落的大的多核细胞；静脉连续给药停药2周后，>95％以上的生精细胞都从生精上皮脱落，曲细精管管腔内细胞层次减少。电镜检查显示生精细胞与支持细胞间的连接点被破坏，间隙增大。停药4周后曲细精管管腔内细胞层次增加，生精能力逐渐恢复。肝肾功能检查，未见异常。血常规检测未见异常。 结论： ①本研究采用的LC-MS/MS法所需血浆样品少，灵敏高，线性范围宽，可用于比格犬血浆中AF-2364的检测。②AF-2364在体内消除快，口服生物利用度低。③AF-2364能有效的、可逆的抑制比格犬睾丸精子的发生，毒性不明显。