目的按蚊是疟疾的传播媒介,常用的媒介控制措施是使用化学杀虫剂。一种利用基因工程技术改造蚊虫共生微生物后重新导入体内,通过工程共生体表达抗疟原虫效应分子的共生菌防治（paratransgenesis）方法被认为是有潜力的疟疾生物防控策略。开展共生菌防治的重要一步是了解按蚊肠道共生菌的定植。目前关于我国本土按蚊种的中肠共生菌研究不足,因此开展按蚊的中肠共生菌多样性研究,有助于进一步理解按蚊与其共生菌、病原体三者间的互作关系,为开发共生菌防治生物防控疟疾传播奠定理论基础。方法1.现场捕蚊:对云南省盈江县、勐腊县和金平县三个边境县11个采样点的牲圈和人房开展人工法和紫外灯光诱法捕抓按蚊,对采集到的按蚊进行形态学分类鉴定。2.共生菌分离培养、鉴定:利用L-B平板对云南省边境地区中华按蚊等13种雌性成年按蚊的中肠可培养共生菌进行分离培养,通过16S rDNA测序和比对基因序列鉴定按蚊中肠可培养共生菌的主要类群。3.中肠共生菌多样性分析:应用16S rRNA扩增子分析技术研究云南省边境地区中华按蚊等8种雌性成年按蚊的中肠共生菌构成多样性。结果在云南省盈江县、勐腊县和金平县三个边境县11个采样点,成功捕获中华按蚊、微小按蚊、迷走按蚊等14种雌性成年按蚊505只。从中华按蚊等9种雌性成年按蚊中肠中分离、纯化得到381株初始细菌,经过挑选后鉴定了234株细菌。234株细菌分别属于变形菌门（Proteobacteria）、放线菌门（Actinobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroidetes）4个门,其中不动杆菌属（Acinetobacter）和假单胞菌属（Pseudomonas）是最优势的细菌种类,占鉴定细菌总数的34.2%（80/234）。对三个地区的微小按蚊、中华按蚊等8种按蚊的中肠DNA进行了16S rRNA扩增子测序并分析,共获得360487条序列用于分析,降噪后一共得到了5675个扩增子序列变异（ASV）用于物种注释。勐腊县可赫按蚊组平均ASV数量高达260个,而勐腊县中华按蚊组平均ASV数最低,仅41个。稀疏曲线表明测序深度充分,ASV的数量足够反映样品中细菌的多样性水平,金平县和勐腊县（除中华按蚊和迷走按蚊）的稀疏曲线均在盈江县的上方,金平县和勐腊县地区按蚊中肠的物种丰度普遍高于盈江县。在门水平上,共检测到25个门的细菌,变形菌门、厚壁菌菌门、拟杆菌门和放线菌门是占优势地位的4个细菌门。在属水平上,野外按蚊中肠共生菌的种类多样,大肠-志贺杆菌属（Escherichia-Shigella）、乳酸杆菌属（Lactobacillus）、假单胞菌属（Pseudomonas）在三个地区所按蚊中相对丰度比较高。中肠共生菌多样性显著性差异分析表明:（1）三个地区间中华按蚊的中肠共生菌构成显著不同。弓形杆菌属、乳酸杆菌属、大肠-志贺杆菌属和假单胞菌属在勐腊县和盈江县的中华按蚊中肠共生菌丰度显著性差异中起重要作用;盈江县和金平县的中华按蚊中肠共生菌丰富度相似,但共生菌的均匀度存在差异。（2）勐腊县的中华按蚊中肠共生菌多样性显著低于盈江县和金平县的中华按蚊。（3）相同地区的按蚊中肠共生菌构成相似,没有在不同蚊种间构成显著性差异的菌种。结论通过分离培养、比对16S rDNA序列和16S rRNA扩增子分析的方法,成功分离鉴定了中华按蚊等9种按蚊中肠的234株可培养共生菌,建立了云南省本土按蚊野外种群的中肠可培养共生菌菌种资源库;获得了中华按蚊等8按蚊的中肠共生菌多样性信息。为进一步研究按蚊中肠共生菌的功能和开发共生菌防治控制疟疾传播奠定基础。