肺癌是致死率最高的恶性肿瘤类型，超过80％的肺癌患者死于复发与转移。肿瘤干细胞(cancer stem cells，CSCs)学说的提出为彻底治愈肺癌带来新的希望。肿瘤干细胞具有自我更新、无限增殖和多向分化的潜能，是肿瘤起始、生长、复发、转移、耐药性产生的根源。由于缺乏特异的分子标志物、表型不明确，无法对肺癌干细胞进行有效的检测和分离，使得肺癌干细胞的研究相对迟缓。本课题以筛选肺癌干细胞特异性结合多肽为基础，期望建立一种不依赖于分子标志物的肺癌干细胞检测和分离方法，从而对肺癌干细胞进行深入的研究。　　我们应用克隆球形成实验对人肺癌H460细胞系中的肺癌干细胞进行富集培养，并对其自我更新能力和增殖能力进行验证。通过细菌展示技术和流式细胞分选技术筛选得到3个H460克隆球细胞特异性结合多肽，流式细胞仪和荧光显微镜对出现频次和结合率最高的HCBP-1多肽理化性质进行检测，结果表明其在游离状态下依然保持了高结合力和特异性。在血清的刺激下，克隆球细胞中的HCBP-1+细胞不仅获得了典型的分化细胞形态，而且失去了HCBP-1多肽结合的能力。此外，H460细胞经药物处理之后活细胞中HCBP-1+细胞的含量增加，说明HCBP-1+细胞具有一定的耐药性。通过对不同来源细胞的microRNA表达谱进行分析发现，与分化细胞相比HCBP-1+细胞中促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、参与分化调控的microRNA表达上调，抑制细胞自我更新和增殖、促进细胞凋亡的microRNA表达下调。以上研究结果表明，HCBP-1+细胞不仅具有自我更新的能力、较强的增殖能力而且还具有分化、耐药性等肿瘤干细胞特征，因此HCBP-1多肽可以用于H460肺癌干细胞的检测和分离。除此以外，我们研究了不同肺癌干细胞亚群之间的相互关系，证实了肺癌干细胞的异质性，并提出了可以应用结合性多肽作为研究肿瘤干细胞异质性的工具这一论断。　　该论文建立了一种基于特异性结合多肽的肺癌干细胞检测分离方法，并对肺癌干细胞的一些特性进行了初步研究，为肺癌干细胞的精确诊断和靶向治疗提供了理论和技术手段。